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中性粒细胞吞噬功能实验报告
篇一:巨噬细胞吞噬实验沉淀实验实验报告 实验二 一巨噬细胞吞噬功能实验 【原理】巨噬细胞是单核吞噬细胞系统的主要细胞,局域活跃的吞噬功能。吞噬细胞受抗原刺激后活化,可使吞噬功能明显增强。 在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后,再给小鼠腹腔注射鸡血红细胞,30min后处死小鼠,取出腹腔液,以冷亚甲蓝染色,显微镜下计数吞噬红细胞的百分数,及观察吞噬细胞内鸡红细胞的数目,以判断吞噬细胞的杀伤能力,由此间接地测定机体的非特异性免疫水平。 【方法】体内法: 实验前3小时,小鼠腹腔注射6%无菌淀粉液1ml,诱导巨噬细胞渗出至腹腔中。 实验时,每只小鼠注射鸡红细胞1ml,轻柔腹部,使其在腹腔中分布均匀,利于吞噬。 30min后,将小鼠拉颈处死,固定,打开腹腔暴露肠管,用载玻片轻擦腹腔,使腹腔液均匀涂于载玻片过,再滴一滴%冷亚甲蓝溶液,盖上盖玻片。 高倍镜下进行观察,计数。 【结果】 【分析】 在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后,再给小鼠注射鸡红细胞后镜检腹腔液,可观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象,并且可看到部分鸡红细胞聚集到吞噬细胞附近。 二沉淀反应双向琼脂扩散实验【原理】将可溶性抗原与相应抗体分别加入琼脂板上的孔内,二者均可发生扩散,并且随扩散距离的增大浓度降低,在抗原抗体比例适宜处形成可见的沉淀线。本实验是定性实验,常用于分析抗原抗体的纯度关系以及相互关系。 【方法】 制板:将熔化的1%琼脂加在载玻片上约5ml 打孔:待琼脂凝固后,将载玻片置于打孔样板上,用打孔器打孔 加样:在中央孔内加抗体,上下两孔加抗原1,左右加抗原二,每孔加10μl 结果观察:将琼脂板置于湿盒,37℃一天后观察结果。 【结果】 在中央孔与添加抗原1的孔之间出现沉淀线,有抗原抗体反应,为阳性反应,说明抗原1与抗体相对应。中央孔与添加抗原2的孔之间没有沉淀线,说明抗原2与抗体之间不相对应。 【分析】抗体与抗原发生扩散时,随扩散距离的增大浓度降低,在抗原抗体比例适宜处形成可见的沉淀线。当有沉淀线出现时,说明有抗原抗体反应。 琼脂铺板时要一次铺成,并且铺设均匀。 打孔时要注意垂直打孔,注意不要有裂隙产生。篇二:中性粒细胞吞噬功能试验(小吞噬试验)中性粒细胞吞噬功能试验 实验目的 1.熟悉中性粒细胞的吞噬作用原理和方法。 实验原理血液中的中性粒细胞即小吞噬细胞,通过趋化、调理、吞入和杀菌等几个步骤,能吞噬和消化衰老、死亡细胞及病原微生物等异物,是机体非特异性免疫的重要组成部分。实验材料 实验方法 片。 瑞氏染色法:取瑞氏染液数滴滴于上述血片上先染1分钟。然后加等量蒸馏水,轻轻晃动混匀,继续染5分钟,水洗,用吸水纸吸干后镜检。 结果观察油镜检查:寻找中性粒细胞,如果染色结果正确,可见细胞核及被吞噬的细菌染 成紫色,而粒细胞的细胞浆则为淡红色。中性粒细胞吞噬试验 计数:1.吞噬百分率:观察100个中性粒细胞,计算其中吞噬有细菌的中性粒细胞数,计算出吞噬细胞百分率。2.吞噬指数:观察100个中性粒细胞,计算其中被吞噬的细菌总篇三:吞噬细胞吞噬功能检测实验 -----吞噬细胞吞噬功能检测实验实验概要 本文介绍了吞噬细胞吞噬功能检测实验的基本原理、操作步骤及注意事项等。 实验原理 吞噬细胞具有对异物(细菌、绵羊红细胞、鸡红细胞等)吞噬和消化的功能,在机体非特异性免疫中发挥重要作用。 小鼠腹腔内注射硫代乙醇酸钠,可刺激巨噬细胞的聚集。四日后小鼠腹腔内注入羊红细胞悬液,一小时后解剖收集腹腔吞嗜细胞,染色、镜检可观察对羊红细胞的吞嗜现象。通过计算吞嗜百分比或吞噬指数可测定吞噬细胞的吞嗜功能。 主要试剂 1.pbs缓冲液 2.3%硫代乙醇酸钠 3.1%羊红细胞悬液 4.瑞氏染液 5.甲醇 主要设备 1.解剖器材 2.注射器 3.尖吸管 4.橡皮吸头 5.小试管 6.载玻片 实验材料icr小鼠实验步骤 1.实验准备:用无菌注射器吸取3%硫代乙醇酸钠3ml,注射于小鼠腹腔内。 2.四日后,注射1%羊红细胞悬液1ml于小鼠腹腔内。 3.注射1小时后,将小鼠用颈椎脱臼法处死,解剖暴露腹腔,于腹腔靠上部位,用镊子轻轻夹起腹膜,将腹膜剪一小口,用尖吸管注入5ml预温的pbs,同时用手反复揉搓腹腔约1—2分钟,以便尽可能多地冲洗出小鼠腹腔的吞噬细胞。 4.用尖吸管吸取腹腔液,置一洁净试管内。 5.用尖吸管将腹腔液吹打均匀(尽量避免产生气泡),吸取一滴滴于载玻片上,加盖玻片镜检。 6.观察结果,也可以将腹腔液涂片,平放于湿盘内,37℃,孵育30分钟。取
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