分子克隆载体与宿主.ppt

第二章 分子克隆载体与宿主 Vecotrs and Host Cells;主要内容;第一节 分子克隆载体的特点;1.分子克隆载体的定义 ;;2.分子克隆载体的功能:;3.发展概况;4.载体的特点;至少有一个复制起点，因而至少可在一种生物体中有效复制，稳定遗传 至少应有一个遗传标记基因，以指示载体或重组DNA分子是否进入宿主细胞 至少应有一个限制酶识别位点，以供外源DNA插入 具有较小的分子量和较高的拷贝数 具有对受体细胞的可转移性, 提高载体导入受体细胞的效率 ;;;;;5.遗传标记基因;;;常用的遗传标记基因 ;;;;;;;β—半乳糖苷酶基因的优点 ;葡萄糖苷酸酶基因（GUS） β-葡萄糖苷酸酶可将X-Gluc降解为兰色产物 适用范围十分广泛，因为许多生物中没有这种基因;;绿色荧光蛋白基因（GFP） GFP是由水母产生的一种可发光的蛋白质 ;问题;;第二节 大肠杆菌克隆载体;主要内容;质粒载体;1. 质粒的基本特性;Plasmids: smaller cycles of double-strand DNA that do not carry essential genes;1). 具有自己的复制起始位点 (Origing)(ori) 和控制复制频率的控制基因及编码基因，形成独立复制子 (Replico) 结构。 2）可扩增性。 ▲严