鸡催乳素和抑制素α亚基片段重组质粒的构建及其表达、蛋白纯化和鉴定-动物遗传育种与繁殖专业论文.docxVIP

兰堡兰耋垒篓型耋：垩董竺墼茎堡苎竺墼塑兰垒兰耋篷：筌窒丝些竺兰塞 兰堡兰耋垒篓型耋：垩董竺墼茎堡苎竺墼塑兰垒兰耋篷：筌窒丝些竺兰塞 型堡 摘要 f，主动免疫催乳素和抑制素可以通过不同的机制影响赡禽的繁殖活动并提高产蛋和繁 殖庄能，因此在制各抑制禽类就巢的基因工程抗娠或疫苗的研究中，选择的思路之一是 pPRL-RSET．家鸡抑制紊a亚基片段经扩增后分别被克隆入质粒pRSET A和 pPRL-RSET的Nhe I和Xho[两克隆位点之间．构建成重组质粒pINB-RSET和 plNB．PRL。以上重组质粒的构建正确性分别由各特定引物组台扩增的PCR产物长度、 特定限制性内切酶消化各重组质粒所得产物长度以及对各质粒的涮序结果得至峨征．重 组质粒pPRL-RSET和plNB-PRL在转化大肠杆菌BL2l(DE．3)株后经IPTG诱导后所 表达的产物经SDS．PAGE显示分别与所预期的重组蛋白分子量大小相符．两种融合蛋白 均是不溶性的．主要以包涵体的形式存在。当O．日m在0．6-0．8之间，IPTG终浓度为 00lmmol，L时．诱导2小时plNB-PRL可获得最大的表达量；加入IPTG至终浓度为 o 005mmo／／L时，诱导4小时pPRL-RSET可获得量大的表达量。质粒pPRL-RSET和 DlNB—PRl．的表达产物和用