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选择性杀灭血液制品中病原微生物(病毒)的研究方法介绍
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血液制品
血液制品是指各种人血浆蛋白制品,人血浆中有92%— 93%是水,仅有7% - 8%是蛋白质,血液制品就是从这部分蛋白质分离提纯制成的。
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血液制品的种类
人血白蛋白
人胎盘血白蛋白
静脉注射用人免疫球蛋白
肌注人免疫球蛋白
组织胺人免疫球蛋白
特异性免疫球蛋白
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主要方法
1 热处理方法
2 有机溶剂/去污剂法(S/D)
3 紫外线照射法
4 光化学病毒灭活法
5 其他方法
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1 热处理方法
原理:使病毒外膜蛋白和衣壳蛋白变性,使病毒包膜上的糖蛋白棘突发生改变。从而阻止病毒吸附于宿主细胞。此外,热力也可破坏病毒复制时所需的酶类。
方法:干热处理、蒸汽加热处理、悬浮加热处理、巴斯德加热处理
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各种热处理方法的比较
灭活方法
处理方法
灭活病毒
无效病毒
主要应用
干热处理
80℃干热处理72h
HIV、HCV和HBV等
耐热的无脂质包膜的人微小病毒B19
F1I的病毒灭活
蒸汽加热
60℃的热蒸汽加热10h
HIV以及肝炎病毒等
暂未发现
静注免疫球蛋白制品的病毒灭活
悬浮加热处理
悬浮于氯仿或庚烷中,60℃加热处理20小时
各种病毒
有发现肝炎病毒
中纯度FⅧ浓制剂和FⅨ复合物
巴斯德加热处理法
有保护凝血因子稳定剂存在,60℃处理10小时
各种脂包膜病毒、蛋白包膜病毒
极少数情况下对乙型肝炎和人微小病毒B19无效
各种液态的血液制品
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巴斯德加热处理法
1948年,巴斯德消毒法首先由Gellts 等在白蛋白的生产过程中应用,即将溶液状态的白蛋白经60℃10小时加热,乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)和人免疫缺陷病毒(HIV)均可被灭活,临床应用及动物实验没有传播病毒性疾病的报道。
经巴斯德加热处理的人血白蛋白制剂在防止肝炎传播方面早有良好的记录
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这几种方法中,用巴斯德消毒法(60℃,10h)处理液体状态的血制品效果较好。
灭活的同时会导致细胞成分发生变性和代谢破坏,不适合对全血和细胞成分的消毒
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2 有机溶剂/去污剂(S/D)法
S/D法是由美国纽约血液中心于八十年代中期开发的病毒灭活方法,自1985年该技术获得FDA认可在美国获准使用以来,迄今已在世界上多个国家和多种血液制品中得到推广,具有良好的应用前景。
其机制就是利用化学试剂破坏脂包膜病毒外膜结构的完整性或靶细胞受体识别位点,使其失去传染性或复制能力。
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用1% 3-正丁基磷酸盐( Tri-n-butyl phsophate, TNBP)TNBP加1% Triton X- 100 在30℃处理血浆4 h。
处理后的血浆按每200 ml 分装, 于-30℃保存2年, 血浆蛋白的活性仍保持良好,凝血因子也未见被激活。
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S/D法的优点:对脂包膜病毒特别有效,且具有不会使蛋白变
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