相衬显微镜的原理.ppt

相衬显微镜的原理及其应用 金相显微镜是靠试样表面反射光的强弱来鉴别组织。当试样上两相反射系数相同，仅有因轻微浸蚀或各相硬度不同而使抛光时形成微小凹凸，或者有塑性变形及共格相变引起的表面浮凸，这时反射光强弱没有差别，只有光程的微小差别。对此，一般金相显微镜不易鉴别当表面高低起伏极小时，更难辨别。当表面高低起伏在100~1500?范围内时，用相衬显微镜能解决问题。 相衬原理由荷兰物理学家泽尔尼克（Zernike）于1934年建立，并于1955年获得诺贝尔物理学奖。 一、相衬显微镜的光学原理 如图，在金相试样的磨面上，两相有微小高度差Δd，若两相反射系数相同，则光在高低两面上反射强度也相等，用肉眼几乎看不到衬度的差别。 因低凹相反射光P比高凸相反射光S多走了2 Δd的光程，即产生了2 Δd的光程差，其周相差Δφ=2π?2 Δd/λ。如图，低凹相的反射光P可以看成是S与D的合成。P比S滞后Δφ相位。这里S与高凸相反射光振幅相同，称为直射光，D为衍射光。因Δd很小， Δφ也很小，可以近似地认为D比S迟后π/2，存在λ/4的光程差，这时S和D叠加后看不出明显衬度。 相衬技术基本原理是：直射光S与衍射光D原来的相位差近似于π/2，首先要设法使S的相位推迟或提前π/2，使S和D变为同相（相位差为零）或反相（相位差为π）。这时S和D干涉叠加后P由于加强或减弱而使低凹相与高凸相的反射光S有了差别。但由于直射光S远大于衍射光D，所以还需将直射光S的振幅压低，使之接近于衍射光D的强度，这样叠加后的P与S有了明显的差别。 这里，直射光S移相和减幅是相衬原理的两条基本原则。 当S和D反相叠加后，高凸相光的强度高于低凹相的强度，高凸相为明亮色，低凹相为黑暗色，称为暗衬，这时又由于S的相位提前π/2，所以又称正相衬。如图所示： 当S和D同相叠加后，高凸相光的强度低于低凹相的强度，这时，高凸相为黑暗色，低凹相为明亮色，称为明衬，这时又由于S的相位推迟π/2，所以又称负相衬。如图所示： 二、相衬显微镜 相衬显微镜光路图： 1、相衬附件 （1）环形光阑（环形遮板） 放在显微镜孔径光阑附近，在使用时，将孔径光阑调到最大，环形光阑常做成圆环形状或同心双环状，也有做成不连续的。如图： （2）相板 是在圆玻璃片上对应于环形光阑透光的圆环处涂上两层不同的膜，一层是氟化镁，起移相的作用；另一层是银或铝，起调幅的作用。 相板有固定相板和活动相板两种。固定相板在物镜的焦平面上，这种物镜是专用的物镜。活动相板使用时可以插入，不用时可以拆下，可以利用显微镜已有的物镜，不必另配相衬物镜，但每个物镜都配有相应的相板。来自光源的光通过物镜试样表面不必经过相环，减少了反射眩光。 （3）辅助透镜 在相衬显微镜中，经过环形光阑得到的环形光束要正好落到相环上，二者必须大小匹配才能很好地得到相衬的观察效果。而相衬显微镜使用的是同一个环形光阑，需要使用辅助透镜。调节辅助透镜的位置，可以使环形光束与相环大小一致，使环形光束完全投影在相环上。为达到如上目的，一般应将相环的尺寸做得略宽于狭缝光环的像。 2、相衬显微镜 * * 带有涂层的环叫相环，控制氟化镁涂层的厚度，使直射光推迟π/2或3π/2（相当于超前π/2）。调幅的多少则取决于银或铝的厚度。 *