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实验二 河蚌育珠手术作业 目的：了解育珠手术操作全过程 实验材料：背角无齿蚌 实验内容： 一。手术前的准备。 二。手术操作 一。手术前的准备 一。手术器具的准备 1.开壳工具 2.制片工具 3.插片工具 4.手术工具的清洗和消毒 二。手术蚌的准备 1.采捕 2.运输 3.暂养 4.选择 三。保养液的准备 1.冷血动物平衡盐保养液 2.PVP组织间液保养液 3.胰岛素保养液 4.金霉素保养液 二。无核珍珠的手术作业 1.细胞小片的制备 剖蚌→去污→分膜→弃去内表皮→取下小片条反拉到切片板上→去污去粘→修边（弃去色线边）→切片（3*3mm 4*4mm 5*5mm 3*4mm 4*6mm ) 2. 细胞小片的插植 排蚌→开口加塞→整鳃去污→创口→取片→送片（插片）→整圆→换侧→扒塞浸水 去除内表皮的三种方法： 1.分离法：用刀在边缘膜靠近前闭壳肌或后闭壳肌附近开一小口，用镊子的一脚插入在内外表皮之间，另一手拿镊子夹住内表皮，两手协作，边伸入边分离，使边缘膜的内外表皮完全分开，插入的镊子一脚应尽可能偏向外表皮，以使制得的细胞小片厚薄均匀而且少带结缔组织。 2.削膜法：用刀片把内表皮均匀地削去。 3.撕膜法：用镊子夹住内表皮，撕去内表皮。 保养液 1.冷血动物平衡盐保养液： NaCL 3.50克 KCL 0.05克 CaCL 0.1克 MgSO4 0.20克 NaHCO3 0.20克 用蒸馏水配成1000毫升。 2.PVP组织间液保养液： 由河蚌外套膜组织间液加配1.5%PVP溶液组成。(PVP = Polyvinylpyrrolidone，化学名称为聚乙烯吡咯烷酮，又可写作PNVP，povidone, polyvidone，crospovidone，为一种水溶性高分子聚合物，其单体为N-Vinylpyrrolidone（N-乙烯基-2-吡咯烷酮），是性能优异、用途广泛的水溶性高分子化合物，属高科技含量、高附加值精细化工产品，是国际倡导的重要化工中间体和医药中间体。) 3.胰岛素保养液： 0.1%胰岛素10毫升，0.07M生理盐水100毫升。 4.金霉素保养液： 用过滤的池水将金霉素配成千分之一浓度的溶液。 插植部位：1.边缘膜 2.中央膜 3.斧足基部 插植排布：“品”字形排布 插植法：1.横插法 2.直插法 插植行数：1.横插→3―4行 2.直插→2―3行 插植数量：根据小片插入后距伤口0.5―0.7厘米，片距1厘米左右的要求，按每侧外套膜植3―4行计算。则一般每只蚌可植40―50片，也有的单位根据自己的经验，按蚌体的大小决定植片的数量，即每厘米体长植3.5片左右。 创口插片时要注意： 1.创口时创口针要平稳，以免刺伤外表皮而形成附壳珠。 2.口大小要适宜，以正好能让小片通过为好，创口过大，易吐片，且不易愈合，过小则当小片强行挤过时损伤小片，并使小片拉长，影响珠形。 3.创创口深浅要适宜，一般三角帆蚌深约0.5―0.7厘米，褶纹冠蚌深约0.7―1.0厘米，过深，影响插片数量，过浅则易吐片或形成焦头珠。 4.小片要一次插送成功，并要送达底部，以便于创口收缩，加快伤口愈合。 5.插片后要整圆，一是为了提高成圆率，二是可以降低吐片率。 6.插片时要先插边缘膜后插斧足基部，以防垮膜而影响继续操作。 7.相邻两行小片，创口与小片的位置应交错排列，亦即创口与小片各自成“品”字形或“▼”形排列。 作业： 写出无核珍珠手术作业的程序和注意事项 * *