环氧合酶-2选择性抑制剂尼美舒利对结肠癌细胞侵袭转移的影响-外科学(普外)专业论文.docxVIP

第三军医大学硕士学位论文 第三军医大学硕士学位论文 5 5 环氧合酶-2 选择性抑制剂尼美舒利对结肠癌 细胞侵袭转移的影响 摘 要 目的环氧合酶(COX) 将花生四烯酸(AA)转变为前列腺素(PG)的限速酶 至少 包括两种异构酶成分 流行病学资料表明长期坚持服用 NSAIDs 药物可以通过抑制 COX 活性 减少前列腺素的产生 使患大肠癌的危险性降低 研究发现结肠癌的发生 发展 转移和肿瘤复发与 COX-2 的高表达有关 但其具体的机制尚未明确 因此加强 对结肠癌侵袭转移机理的研究 并针对各种诱发因素进行防治是非常必要的 尼美舒 利属于甲磺酰苯胺类药物 是一种选择性 COX-2 抑制剂 可以选择性抑制 COX-2 表 达 进而抑制结肠癌的转移和复发 为此我们对尼美舒利影响结肠癌细胞浸润转移能 力的作用进行了实验研究 并探讨了尼美舒利在结肠癌治疗中的化学预防作用 方法应用 MTT 比色分析法和流式细胞技术观察尼美舒利对人结肠癌细胞增 殖及细胞周期分布的影响 应用免疫组化 S-P 法检测尼美舒利对结肠癌细胞 E-cadherin 的表达的影响 应用 RT-PCR 方法检测尼美舒利对结肠癌细胞 ICAM-1 mRNA 表达的 影响 应用改良的明胶酶谱分析方法检测尼美舒利对结肠癌细胞 MMP-2 活性成分的 表达的影响 结果MTT 分析结果显示尼美舒利对人结肠癌细胞的生长抑制作用呈现时间- 剂量依赖模式 肿瘤细胞周期分布分析提示尼美舒利具有明显促进肿瘤细胞 G0/G1 期 阻滞作用 应用尼美舒利可以上调 HT-29 细胞 E-cadherin 表达 而对 HCT-116 细胞 E-cadherin 表达无明显作用 应用尼美舒利可以下调 HT-29 细胞 ICAM-1 mRNA 表达 对 HCT-116 细胞 ICAM-1 mRNA 表达无明显作用 应用尼美舒利可以减少 HT-29 细 胞的 MMP-2 酶活性成分表达 而对 HCT-116 细胞 MMP-2 成分的表达无明显作用 结论尼美舒利可能通过选择性抑制 COX-2 表达 进而抑制肿瘤细胞的增殖 同时影响与肿瘤浸润转移密切相关的因素如 E-cadherin ICAM-1 和 MMP-2 等的表达 降低肿瘤细胞的侵袭转移能力 关键词 结肠肿瘤 COX-2 E-cadherin ICAM-1 MMP-2(9) 免疫组化 RT-PCR 明胶酶谱分析技术 细胞外基质 PAGE PAGE 3 Effects of nimesulide cyclooxygenase-2 selected inhibitor on invasion and metastasis activity of human colon cancer cells Abstract Objective: Cyclooxygenase-2 (COX-2), the rate-limiting enzyme that converts arachidonic acid to prostaglandin, have two isoenzymes, COX-1 and COX-2. Epidemiologic studies have shown an inverse correlation between the incidence of colon cancer and the usage of nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs), which inhibit prostaglandin synthesis. The NSAIDs target cyclooxygenases (COX). Studies show there is a close relationship between the overexpression level of COX-2 and the occurrence, progression, metastasis and recurrence of colon cancer, but the specific mechanism is unknown. It is necessary to investigate the mechanism of invasion and metastasis and prevention from forming of colon cancer. Nimesulide, a kind of cyclooxygenase-2 selected inhibitor drugs, belong to methylsulfonyl benzenamine, is supposed to