大孔吸附树脂纯化胡芦巴提取物中羟基异亮氨酸的研究＊.PDF

世界科学技术—中医药现代化★探索 大孔吸附树脂纯化胡芦巴提取物中 4-羟基 异亮氨酸的研究＊ 戴　宇，宋川霞，陈红梅，胡　佳，吴成丽，邓　赟＊＊ （成都中医药大学药学院　成都　611137） 摘　要 ：目的：优选出纯化胡芦巴提取物中4-羟基异亮氨酸的大孔树脂，并确定相应的最佳工艺条件。 方法：以胡芦巴提取物中4-羟基异亮氨酸含量为评价指标，采用柱前衍生- 高效液相色谱法检测24 种型号 大孔树脂静态吸附试验前后4-羟基异亮氨酸（4-HIL ）含量变化来考察其纯化效果。结果：24 种型号大孔 树脂对4-HIL 吸附容量均很低，但ADS-5 型大孔树脂可用于胡芦巴提取物中4-HIL 初步纯化，最佳工艺 条件为采用ADS-5 型大孔树脂，上样液浓度为0.04 g mL-1 ，上样量为60 mL ，上样流速为2 BV h-1 ，收集续 · · 滤液蒸干可得。结论：ADS-5 大孔树脂可用于其初步除杂。 关键词 ：4-羟基异亮氨酸　大孔树脂　吸附　纯化 doi ：10.11842/wst.2015.01.052　　中图分类号：R284.2　　文献标识码：A [7,8] 胡芦巴为豆科植物胡芦巴（Trigonella foenum- 面上常见常用的24种不同型号大孔吸附树脂 ， graecum…L.）的干燥成熟种子，具有温肾助阳、祛寒 对胡芦巴提取物中4-HIL进行纯化工艺初步研究， [1] 以期用最便捷的方法得到较高纯度的4-HIL，为其 止痛之功效 。胡芦巴提取物具有明显降糖作用并 [2] 进一步纯化研究奠定基础和提供一定参考。 能显著改善胰岛素抵抗 ，但胡芦巴提取物成分复 [3] 杂，课题组前期对其进行了化学成分研究 ，以期 1　仪器与试药 阐述化学成分和活性之间关系。4-羟基异亮氨酸 （4-hydroxyisoleucine，以下简称4-HIL）是存在于 SSI…series…1500高效液相色谱仪（美国SSI公 胡芦巴种子中的一种非蛋白氨基酸，可促进胰岛素 司）；紫外检测器；CSChrom…Plus色谱工作站；色 [4，5] 谱 柱 Inertsil…ODS-3（250…mm×4.6…mm，5…μm），… 分泌、调节血糖血脂 ，为胡芦巴降糖降脂作用的 主要活性成分之一。最新研究表明，4-HIL还具有 C/N.5020-01732，S/N.1A713327（GL…Sciences… [6] lnc.）；BP211D型电子分析天平（北京赛多利斯仪 较好的抗抑郁作用 。4-HIL药理作用的开发已成 为研究热点，但其提取纯化工艺鲜有文献报道，利 器有限公司）；优普UPT系列超纯水器（成都优普 用大孔吸附树脂对4-HIL纯化工艺研究更未见报 电子产品有限公司）；恒温水浴锅W201（上海申胜 道。本课题组在前期试验中发现胡芦巴提取物的主 生物技术有限公司）；数显恒温水浴振荡器SHZ-88 要成分有4-羟基异亮氨酸、胡芦巴碱，还有其它氨 （金坛市医疗仪器厂）。 基酸类、糖类、色素类等其它成分。本研究选用市 HPD100，HPD200A，HPD200B，HPD300， HPD400，HPD45