动植物细胞培养动力学[精品ppt课件].pptxVIP

5.1、动植物细胞培养的特性 5.2、植物细胞培养及反应动力学 5.3、动物细胞培养及反应动力学;5.1 动植物细胞培养的特性; 早在1907年，美国的Harrison在世界上首次将蛙的神经组织在试管内培养成功，建立起动物组织体外培养的第一块基石。 1950年前后，Enders及其同事发表了第一篇关于在培养细胞中生长病毒的报告，开拓了以动物病毒为研究对象的新领域。 作为大规模细胞培养，Copsik等人成功的进行了有关仓鼠肾细胞（BHK）的悬浮培养。随后，采用在培养液中添加人工合成的小球状惰性聚合体载体，大幅度提高了细胞的产量，并在10000升发酵罐内成功地进行深层培养。 ; 随着基因工程技术的发展，人们逐渐认识到有许多基因产物不能在原核细胞内表达，它们需要经过真核细胞所特有的翻译后修饰，以及正确的切割、折叠后，才能形成与自然分子一样的功能和抗原性。使得动物细胞一跃成为一种重要的宿主细胞，用以生成多种生物制品，例如病毒疫苗、淋巴因子（干抗素和白细胞介素等）、单克隆体、红细胞生成素、纤维蛋白溶酶原激活剂、第八因子、肿瘤坏死因子、上皮生长因子和过氧化物歧化酶等。这些采用大规模细胞培养技术生产贵重药品在临床诊断、治疗和预防等方面都有重要意义。;动物细胞无细胞壁，机械强度低，适应环境能力差； 生长速度缓慢，易受微生物污染，培养时需要抗生素； 大多数哺乳动物需附着在固体或半固体的表面生长； 对营养要求严格； 大规模培养时，不可简单地套用微生物培养的经验。;动植物细胞培养与微生物培养性能的相比; 大规模细胞培养的主要危险之一是微生物污染。设备、培养基、悬浮系统和操作方法等的复杂性都易引起微生物污染，这是细胞培养都存在的一个普遍问题，在大规模培养更为严重。 动物细胞生长十分缓慢，并易为大多数微生物污染物所破坏。支原体（mycoplasma）对动物细胞培养的威胁最大，因为其感染力强且不易检出。 因此，大规模细胞培养成功的必要条件是要有一个设备精良的细胞库（cell　bank）。在细胞库中的冷冻细胞不受污染。; 动物细胞培养基的配方十分复杂，并且还需补充血清和蛋白胨。 原料的质量控制和培养基的生产是大规模细胞培养的主要问题。因为血清来源困难，质量不稳定，残留血清给产物提纯带来困难等。虽然可采用无血清培养基，但在无血清培养基中更可能出现细胞毒。因此，与培养物相接触的水必须采用高纯度的水。 培养基一般需经膜过滤器过滤。可保证其无菌状态，但支原体也可被0.1μm的过滤膜滤出。; 目前，利用动物细胞培养的方法生产的有用产品大致可分为4大类： （1）疫苗 如狂犬病疫苗、麻疹疫苗和脊髓灰质炎疫苗等。 （2）干抗素 如α-干扰素和β-干扰素等。 （3）单克隆抗体 如抗绵羊红细胞单克隆抗体等。 （4）遗传重组产品 如人生长激素、免疫球蛋白等。;（1）生长速率慢，易为微生物等污染，但可采用在培养基中加入抗生素等措施； （2）细胞个体大且无壁，对环境敏感，因此应慎重解决供氧（搅拌与通风）与细胞脆弱的矛盾； （3）设备放大是一新课题，不能完全按照微生物反应过程的经验； （4）反应过程成本高，主要用于高附加值产物的生产。;5.1.2 植物细胞培养的特性; 与微生物相比，植物细胞具有的特性; 20世纪90年代以来，伴随着紫杉醇的研究成功并应用于临床，植物细胞培养及其次级代谢产物的研究进入了新的发展时期，尤其是诱导子、前体饲喂、两相法培养、质体转化、毛状亘和冠瘿瘤组织培养等新技术和新方法的发现和发展，更显示了植物细胞培养工程制药的广阔发展前景。 另外，将固定化技术应用于植物细胞培养中的研究对有效的改善植物细胞培养中出现的不足有一定成效。可以认为，固定化技术是有可能在植物细胞培养中得以应用。;5.2 植物细胞培养及反应动力学; 蔗糖为碳源时，植物细胞首先分解蔗糖为葡萄糖和果糖，而后优先利用葡萄糖。 分别以果糖或葡萄糖为碳源分批培养烟草细胞时,前者有：; 由于动植物细胞的培养过程是好氧过程，因此，许多科技工作者研究了与细胞呼吸速率相关的因素。 例如，人参细胞培养中，添加椰子汁后细胞的生长速率加快，耗氧量较不添加椰子汁时明显增大。 另外，也有报道，Acer．Psedoplatanus Ｌ 细胞培养中，细胞体内的含氮量与耗氧量有正比例关系。; 加藤等所获得的烟草细胞分批培养的结果表明：当氧为细胞生长的限制性因素时， 与Qo2有与上式相似的关系。说明植物细胞培养中氧的消耗，部分用于维持代谢，部分用于生长繁殖，所获得的;三、胞内物质与生长模型;5.2.2