临床病原体检测剖析课件.pptVIP

临床病原体检测; 教学目的要求; 主要教学内容;感染的变迁及当前感染的情况;一、临床常见病原体的检测方法; 二、细菌的耐药性及耐药机制;理化机制（重点） ---灭活酶或钝化酶的产生 ---药物作用靶位的改变 ---膜通透性改变 ---主动外排作用 ---存在抗生素抑制旁路 ---生物被膜的屏障作用 ---缺乏药物的转运机制 --举例—ESBLs,MRSA,Pae;抗菌药物; 三、常见耐药菌的监测;耐药性检测的方法 ---纸片扩散法（定性检测） 如：最常用的KB法 ---稀释法（定量检测） 如：琼脂稀释法、微量肉汤稀释法 ---E-test法（定量检测） 此为结合稀释法和扩散法原理和特点而设计的一种简便、精确的测定MIC的方法。缺点：价格昂贵。;几个重要的概念 药物敏感性试验—简称药敏试验，是指检测细菌对抗菌药物的敏感性（或耐药性）的一种体外试验。 警告：体外试验结果与体内效果不一定一致。 MIC：最低抑菌浓度，即抑制细菌生长所需要的最低药物浓度。 MIC90：抑制90%试验菌株生长所需要的最低药物浓度。 MIC50：抑制50%试验菌株生长所需要的最低药物浓度。;敏感（susceptible,S) ---指用常规剂量的抗菌药物在体内能够达到的浓度可以治愈细菌引起的感染，禁忌证除外。 中介（intermediate,I) ---指抗菌药物对试验菌株的MIC值可接近血和组织中可达到的药物浓度，但抑菌速率低于敏感株。 耐药（resistant,R) ---指允许的最大剂量的抗菌药物在组织或血液中的浓度仍达不到抑菌目的。;临床常见耐药菌的监测 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的筛选测定 ---是目前导致医院感染的重要病原菌 ---定义和判读标准：;超广谱b-内酰胺酶（ESBL）检测 ---目前只用于大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和奇异变形杆菌。 ---判读方法及标准（按CLSI-2010执行） ---ESBL阳性菌株的药敏结果处置 青霉素类、头孢菌素类和氨曲南都需报告为耐药，无论体外药敏结果是敏感还是耐药！;高水平氨基糖苷类药物耐药（HLAR）和万古霉素耐药肠球菌的筛选 ---目的和意义：判断联合用药的可行性和效果 ---测试药物：GN、链霉素、万古霉素（必须用稀释法测MIC值） ---检测方法：纸片扩散法（临床实验室最常用）、稀释法（包括琼脂法和肉汤法）、E-test法 ---结果处置：若为耐药，则氨基糖苷类抗生素与作用于细胞壁合成药物（如：青霉素类和万古霉素）联合不出现协同。;耐青霉素肺炎链球菌（PRSP）的筛选测定 ---目的和意义：早期及时筛选出此类肺炎链球菌，指导临床合理用药。 ---筛选方法：1ug苯唑青霉素纸片筛选 ---判断方法：若抑菌圈20mm，则测试菌对青霉素G敏感；若抑菌圈19mm，则提示该菌对青霉素耐药或中度敏感，需用稀释法或E-test进一步测其MIC值。; 四、临床标本采集和运送 （重点掌握）;----皮肤消毒：静脉穿刺前必须对穿刺部位用杀菌剂仔细消毒（非常重要！），并需等待皮肤上的消毒剂完全挥发。可用2%碘酊、10%皮维碘、70%酒精、含0.5%氯已定的70%酒精。 注意事项： 必须一人一针！ 如果病人在输液，不能从输液管中抽血做血培养！而是尽可能从远离输血部位处抽血。 将血液用注射针刺入培养瓶前，必须先将培养瓶外盖取下后用消毒剂消毒瓶盖！注入后立即混匀！ 如果一次抽血要做多项检查，必须先抽血培养的血（可直接注入血培养瓶）。 总原则：尽可能避免培养前标本污染！;脑脊液标本 ---采集：由内科医生进行腰穿或脑室穿刺。 ---采集量：成人2-5ml；儿童2-5ml；婴幼儿或新生儿1-2ml。 注意事项： 标本必须置于无菌试管中 标本需立即保温送检或床边接种;尿液标本 --无菌操作（需用带盖的无菌容器！） --培养用尿液需留中段尿 --采集前清洗外阴（尤其是女性和儿童！） 方法：先清洁手后用无菌纱布和温肥皂水从前到后清洗外阴。注意：不要用消毒剂！ --女性需避开月经期 --对于厌氧菌培养，采用膀胱穿刺法收集、无菌厌氧小瓶运送。 --尽快送检，最多不迢过1小时！;上呼吸道标本 ---理论上，标本采集应由专业医师或受过专门训练的人完成。 ---方法：病人面对光源，用压舌板将舌下压，用无菌棉拭子用力擦拭两侧扁桃