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第17章 支原体 支原体(mycoplasma)是一类没有细胞壁的原核细胞型微生物。细胞膜含固醇,能通过0.45?m滤菌器;但呈二分裂繁殖,含DNA与RNA。支原体是目前所知能在无生命培养基中繁殖的最小微生物。过去曾称为类胸膜肺炎微生物(pleuropneumonia-like organism, PPLO),由于它们能形成有分枝的长丝,故称之为支原体。 第一节 概 述 支原体因其没有细胞壁故归属于柔膜体纲(Mollicute)的支原体目(Mycoplasmatales)。下分3个科:?支原体科(Mycoplasmataceae); ?无胆甾原体科(Acholeplasma-taceae),生长时不需要外源性胆固醇; ?螺原体科(Spiroplasmataceae),生长至一定阶段呈螺形。在支原体科中又分支原体(Mycoplasma)和脲原体(Ureaplama) 2个属。支原体属现知有64个种,而脲原体属 仅2个种。其中对人致病的主要为肺炎支原体(M.pneumoniae)、人型支原体(M.hominis)、生殖器支原体(M.genitalium)、穿透支原体(M.penetraus)和 溶脲脲原体(U.urealyticum)。 一、生物学性状 形态与结构 支原体是原核细胞生物中最小的,大小一般在0.2~0.3?m,很少超过1.0?m。最外层是细胞膜,由蛋白质与脂质组成的三层结构。内、外二层主要是蛋白质,中间层为脂质。在脂质中固醇约占36%。凡能作用于固醇的物质,如二性霉素B、皂素、毛地黄苷等能引起支原体细胞膜的破坏而死亡。有的支原体在细胞膜外还有一层由多聚糖构成的荚膜,有毒性,是支原体的一种致病因素。 支原体以二分裂繁殖为主,也见出芽、分枝或由球体延伸成长丝,然后分节段成为许多球状或短杆状的颗粒(图17-1)。 图17-1 有的支原体有一种特殊的顶端结构,能使支原体粘附在宿主上皮细胞表面。这与支原体在粘膜上的定植和致病有关。有些支原体能运动,在支原体内有许多微丝组织成网,和运动有关。在前进方向微丝成束,向前突出。也有认为顶端结构在表面上呈交替粘附和释放,造成支原体在表面滑动。支原体无细胞壁,具有可塑性,能通过0.45?m滤膜。 支原体和其他原核生物一样,基因组是一个环状双链DNA。分子量较小,只有大肠埃希菌的1/5,故其合成和代谢很有限。支原体用普通染色不易着色,用Giemsa法染色着色很浅。革兰染色阴性。 培养特性 支原体的营养要求比一般细菌高。除无胆甾原体外,培养基中必须加入10%~20%人或动物血清。血清主要用于提供固醇和其他长链脂肪酸,不但是细胞膜合成需要,且具稳定细胞膜的作用。 支原体一般在pH7.8~8.0间生长,低于7.0则死亡。但溶脲脲原体最适的 pH为6.0~6.5,因在培养时溶脲脲原体分解尿素产氨,可使培养基pH升高。当培养基指示剂变色即需移种,否则将迅速死亡。支原体一般为兼性厌氧,仅个别菌株专性厌氧。支原体生长缓慢,在含1.4%琼脂的固体培养基上孵育2~3d(有的需要2周)后出现菌落。典型的菌落呈荷包蛋样,核心较厚,向下长入培养基,周边为一层薄薄的透明颗粒区(图17-2)。有的整个菌落呈颗粒状。肺炎支原体的菌落较大,直径100~150?m。溶脲脲原体的菌落最小,仅10~40?m,故曾称“T”株(tiny strain)。支原体的菌落小,宜在低倍镜下观察。 图17-2 在液体培养基中支原体的生长量较少,且个体小,一般不易见到混浊,只有小颗粒沉于管底。溶脲脲原体在生长量最大时每ml不超过106~107个菌落形成单位(CFU),故液体清亮。支原体在固体和液体培养基中生长达高峰后,若继续培养,则很快死亡。在低温下可延长存活时间。 支原体是污染细胞培养的一个重要因素,支原体在细胞培养中不一定都引起细胞病变,但可影响这些细胞用于病毒培养。 生化反应 支原体可根据是否能利用葡萄糖、水解精氨酸和尿素来进行鉴别。 表17-1 人类主要支原体生物学性状 支原体 葡萄糖 精氨酸 尿素 吸附细胞 致病性 肺炎支原体 + — — 红细胞 肺炎、支气管炎 人型支原体 — + — — 泌尿生殖道感染 生殖器支原体 + — — — 泌尿生殖道感染 穿透支原体 + +

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