免疫细胞分离与免疫细胞功能检测和应用.ppt

(四) 体内试验 特异性抗原皮肤试验 PHA皮肤试验 二、B细胞功能检测 B细胞增殖能力的试验 溶血空斑试验 B细胞抗体形成功能的检测 体内试验 (一)B细胞增殖能力的试验 抗IgM 细菌脂多糖 SAC的SPA B细胞增殖 形态学 3H－TdR掺入法 (二) 溶血空斑试验 1. 原理： 2. 方法学： 经典溶血空斑形成试验 被动溶血空斑试验 3．临床应用与评价 溶血空斑试验主要用于测定药物和手术等因素对体液免疫功能的影响 评价免疫治疗或免疫重建后机体产生抗体的能力。 (三)　 B细胞抗体形成功能的检测 ——酶联免疫斑点法 1.原理： 2．应用与方法学评价： 该方法既可检测抗体分泌细胞，又可检测抗体分泌量。 优点： 稳定、特异、抗原用量少； 可同时检测不同抗原诱导的不同抗体分泌，并可定量；可检测组织切片中分泌抗体的单个细胞。 (四)　体内试验 体内抗体产生的特异性抗原有白喉类毒素、破伤风类毒素、多价肺炎链球菌菌苗等。 将适量抗原皮下或肌肉注射免疫，并于免疫前及免疫后1周、2周、3周分别采血，分离血清，测定受检者免疫前后相应抗体的效价，判断受检者体内B细胞的功能。 染色计数 离心取上清 测LDH或AKP 离心取沉淀 测活细胞荧光 测发光强度 测CPM值 形态法 酶释法 荧光法 同位素法 化学发光法 三、NK细胞活性测定 靶细胞溶解 常用靶细胞: K