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目 录
摘 要 3
Abstract4
第一章 前言5
1.1 大豆疫病研究概况5
1.1.1 大豆疫病的发生及危害5
1.1.2 大豆疫病的防治方法6
1.2 放线菌的研究进展7
1.2.1 放线菌的分离7
1.2.2 土壤放线菌的鉴定7
1.2.3 放线菌的拮抗机理8
1.2.4 生物防治中的应用前景及存在问题9
1.3 本研究的研究目的、意义及研究内容10
第二章 放线菌的分离、纯化与鉴定12
2.1 材料与方法12
2.1.1 培养基12
2.1.2 生化试剂及溶液配制12
2.1.3 供试仪器13
2.1.4 土样采集与处理14
2.1.5 放线菌的分离与纯化14
2.1.6 拮抗放线菌的初步筛选14
2.1.7 基因组 DNA 的提取14
2.1.8 放线菌 16S rDNA 序列的 PCR 扩增 15
2.1.9 16S rDNA 的 PCR 产物回收 16
2.1.10 连接反应17
2.1.11 DH5α 感受态细胞的制备及转化 17
2.1.12 质粒提取18
2.1.13 双酶切验证18
2.1.14 放线菌对大豆疫霉菌菌丝形态结构的影响19
2.2 结果和分析19
2.2.1 放线菌的分离与纯化19
2.2.2 拮抗放线菌的初步筛选19
2.2.3 放线菌 16S rDNA 序列的 PCR 扩增 20
2.2.4 序列比对分析和系统进化分析20
2.2.5 拮抗放线菌对大豆疫霉菌菌丝形态结构的影响21
2.3 讨论23
第三章 发酵液对病原菌形态的影响24
3.1 材料与方法24
3.1.1 实验试剂24
3.1.2 拮抗靶标菌24
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