食品生物化学实验指导.doc

08食品科学食品生物化学实验要求 学生做实验前必须写好实验预习报告，做好实验预习，无实验预习报告者不许进入实验室。每大组实验人数20-24人，4人一小组。 实验试剂的配制，现场由教师指导，学生操作完成。具体过程如下：（1）每大组只配制自己大组所用试剂，不得多配、浪费；（2）每小组派一人，一大组共选出5-6人来共同完成试剂配制工作。其他学生在自己组的台面准备其他试验工作，如领用器皿，滴定管的与准备等工作；（3）各小组成员轮换派人配制试剂，即做一次实验换一次人，保证每个学生都经历了配制试剂的过程。（4）学生在试剂配制过程中，掌握试剂配置的基本步骤，基本方法和注意事项。 实验室所有设备都必须按说明书使用，器皿要小心使用，按规范要求操作，如有损坏，照价赔偿。 卫生要求：每次试验完毕小组成员务必将本试验台及地面收拾整洁，器皿摆放整齐有序，如哪组成员发现没有搞好自己组的环境卫生，这次试验的所有组员的实验报告都会扣分。 08食品科学食品生物化学实验项目表 1.淀粉的显色和水解（3学时） 2.双缩脲法测定蛋白质含量（3学时） 3.牛奶中酪蛋白等电点测定（3学时） 4.酶的性质实验（4学时） 5.氨基酸的分离鉴定（3学时） 6.或蛋白质的颜色反应（3学时） 实验总课时：16学时 实验一 淀粉的显色和水解 一、实验目的和要求 1、进一步了解淀粉的性质及淀粉水解的原理和方法。 2、如何验证淀粉是否水解及其水解的条件和产物。 二、实验原理 1、淀粉与碘的反应 直链淀粉遇碘呈蓝色，支链淀粉遇碘呈紫红色，糊精遇碘呈蓝紫、紫、橙等颜色。这些显色反应的灵敏度很高，可以用作鉴别淀粉的定量和定性的方法，也可以用它来分析碘的含量。纺织工业上用它来衡量布匹退浆的完全度，它还可以用来测定水果果实（如苹果等）的淀粉含量。 近年来用先进的分析技术（如X射线、红外光谱等）研究碘跟淀粉生成的蓝色物，证明碘和淀粉的显色除吸附原因外，主要是由于生成包合物的缘故。直链淀粉是由α-葡萄糖分子缩合而成螺旋状的长长的螺旋体，每个葡萄糖单元都仍有羟基暴露在螺旋外。碘分子跟这些羟基作用，使碘分子嵌入淀粉螺旋体的轴心部位。碘跟淀粉的这种作用叫做包合作用，生成物叫做包合物。 在淀粉跟碘生成的包合物中，每个碘分子跟6个葡萄糖单元配合，淀粉链以直径0.13 pm绕成螺旋状，碘分子处在螺旋的轴心部位。 淀粉跟碘生成的包合物的颜色，跟淀粉的聚合度或相对分子质量有关。在一定的聚合度或相对分子质量范围内，随聚合度或相对分子质量的增加，包合物的颜色的变化由无色、橙色、淡红、紫色到蓝色。例如，直链淀粉的聚合度是200～980或相对分子质量范围是32 000～160 000时，包合物的颜色是蓝色。分支很多的支链淀粉，在支链上的直链平均聚合度20～28，这样形成的包合物是紫色的。糊精的聚合度更低，显棕红色、红色、淡红色等。下表就是淀粉的聚合度和生成碘包合物的颜色。 表 2-1　淀粉的聚合度和生成碘包合物的颜色 葡萄糖单位的聚合度 3.8 7.4 12.9 18.3 20.2 29.3 34.7以上 包合物的颜色 无色 淡红 红 棕红 紫色 蓝紫色 蓝色 淀粉跟碘生成的包合物在pH=4时最稳定，所以它的显色反应在微酸性溶液里最明显。 2、淀粉的水解 淀粉是一种重要的多糖，是一种相对分子量很大的天然高分子化合物。虽属糖类，但本身没有甜味，是一种白色粉末，不溶于冷水。在热水里淀粉颗粒会膨胀，有一部分淀粉溶解在水里，另一部分悬浮在水里，形成胶状淀粉糊。淀粉进入人体后，一部分淀粉收唾液所和淀粉酶的催化作用，发生水解反应，生成麦芽糖；余下的淀粉在小肠里胰脏分泌出的淀粉酶的作用下，继续进行水解，生成麦芽糖。麦芽糖在肠液中麦芽糖酶的催化下，水解为人体可吸收的葡萄糖，供人体组织的营养需要。反应过程为：（C6H12O5）m→(C6H10O5)n→C12H22O11→C6H12O6 淀粉 糊精 麦芽糖 葡萄糖 葡萄糖是淀粉最重要的下游产品之一，工业生产中常常使用玉米淀粉水解来加工结晶葡萄糖。 三、试剂和器材 1、器材：试管夹、量筒、烧杯各一只、白瓷板一块、试管一支、水浴锅。 2、试剂：淀粉及0.1％溶液 、10％NaOH溶液、20％H2SO4溶液、10％Na2SO4溶液、稀碘液、乙醇、2%CuSO4溶液。 四、操作步骤 1、淀粉与碘的反应 ①取少量淀粉于白瓷板空内，加碘液两滴，观察颜色。 ②取试管一支，加入0.1％的淀粉6ml，碘两滴，摇匀，观察颜色变化。另取试管两支，将此淀粉均分为三等份并编号做如下实验： 1号管在酒精灯上加热，观察颜色变化。然后冷却，又观察颜色变化。 2号管加入10％NaOH溶液几滴，观察颜色变化 3号管加入乙醇几滴，观察颜色变化。 记载上述实验过程和结果，并解释现象。 2、