唾液淀粉酶活性的观察的实验报告.docx

唾液淀粉酶活性的观察的实验报告 　　影响唾液淀粉酶活性的研究　　摘要：讨论了不同条件下唾液淀粉酶的活性差异，实验结果表明，影响唾液淀粉　　酶活性的因素很多，必须在适宜的条件下，才能发挥最佳催化作用；淀粉酶具有　　高度专一性，其活性受温度、ｐＨ值、激活剂及抑制剂、酶浓度以及作用时间等多　　种因素的影响；每个人产生唾液淀粉酶的量不同，活性强弱也有差异。　　关键词：淀粉酶；活性；温度；抑制剂；激活剂；专一性　　2影响唾液淀粉酶的活性的因素　　实验目的　　观察淀粉在水解过程中遇碘后溶液颜色的变化。观察温度、pH、激活剂与抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响。　　实验原理　　人唾液中淀粉酶为α-淀粉酶，在唾液腺细胞中合成。在唾液淀粉酶的作用下，淀粉水解，经过一系列被称为糊精的中间产物，最后生成麦芽糖和葡萄糖。变化过程如下：　　淀粉→紫色糊精→红色糊精→麦芽糖、葡萄糖　　淀粉、紫色糊精、红色糊精遇碘后分别呈蓝色、紫色与红色、麦芽糖和葡萄糖遇碘不变色。　　淀粉与糊精无还原性，或还原性很弱，对班氏试剂呈阴性反应。麦芽糖与葡萄糖是还原性糖，与班氏试剂共热后生成红棕色氧化亚铜的沉淀。　　唾液淀粉酶的最适温度为37-40°C，最适pH为偏离此最适环境时，酶的活性减弱。　　低浓度的Cl-离子能增加淀粉酶的活性，是它的激活剂。Cu2+等金属离子能降低该酶的活性，是它的抑制剂。　　器材及试剂　　1、器材：试管、酒精灯、烧杯、恒温水浴锅、量筒、冰浴、玻璃棒、试管夹、白磁板、试管架、铁三脚架、唾液淀粉酶　　2、试剂：1％淀粉溶液、碘液、班氏试剂、％HCl溶液、％的乳酸溶液、1％NaCl溶液、1％CuSO4溶液、％淀粉溶液　　操作步骤　　1、淀粉酶活性的检测：取一只试管，注入1％淀粉溶液5mL与稀释的唾液。混匀后插入1支玻璃棒，将试管连同玻璃棒置于37°C水浴中。不是的用玻璃棒从试管中取出1滴溶液，滴加在白磁板上，随即滴加1滴碘液，观察溶液呈现的颜色。此实验延续至溶液仅表现碘被稀释后的微黄色为止。记录淀粉在水解过程中，遇碘后溶液颜色的变化。　　向上面的剩余溶液中加2mL班氏试剂，放入沸水中加热10分钟左右，观察现象　　2、pH对酶活性的影响：取4支试管，分别加入％盐酸、％乳酸、蒸馏水与1％碳酸钠各2mL，再向以上四支试管中各加2mL1％淀粉溶液及2mL淀粉酶试剂，在沸水浴中加热，根据生成红棕色沉淀的多少，说明淀粉水解的强弱。　　3、温度对酶活性的影响：取3支试管，各加3mL1％淀粉溶液；另取3支试管，各加1mL淀粉酶液。将此6支试管分为3组，每组中盛淀粉溶液与淀粉酶液的试管各1支，三组试管分别置于0°C、37°C与70°C的水浴中。5分钟后，将各组中的淀粉溶液倒入淀粉酶液中，继续维持原温度条件5min后，立即加2滴碘液，观察溶液颜色的变化。根据观察结果说明温度对酶活性的影响。　　4、激活剂与抑制剂对酶活性的影响：取3支试管，按下表加入各种试剂。混匀后，置于37°C水浴中的保温。从1号试管中用玻璃棒取出1滴溶液，置于白磁板上用碘液检查淀粉的水解程度。待1号试管内的溶液遇碘不再变色后，立即取出所有的试管，各加碘液2滴，观察溶液颜色的变化，并解释之。　　1.　　加入班氏试剂后　　值对酶活性影响：1号深红色，2号为红棕色，3号为砖红色，4号为偏蓝。因为PH＝1时，超出了淀粉酶有效PH范围，使得酶完全失活，淀粉没有被分解。2号是因为PH=5时，不是淀粉酶的最适范围。3号是因为PH　　＝　　7时，为淀粉酶分解的最适PH，淀粉被酶迅速分解生成麦芽糖和葡萄糖。而4号则是因为PH＝9超出了淀粉酶的适宜PH，活性受到或者是部分失活，使淀粉分解较慢。　　3.温度对酶的影响：1号显紫红色，2号为淡黄色，3号为深蓝色。当温度为0度时，蛋白质分子的热运动减慢，即酶分子的活性受到了抑制，使酶的活性降低了，淀粉分解减慢，生成紫红色的糊精；2号处于37度，接近人体温度，酶的活化性能较高，淀粉被分解成麦芽糖和葡萄糖就越快，所以是淡黄色，而当温　　度为70度时，由于酶是蛋白质，遇到高温时会失活，所以淀粉没有被分解。　　4.激活剂和抑制剂对酶的影响：3号作为对照实验组，显红棕色，1号显浅黄色，2号显深蓝色。因为在1号溶液中，NaCl对酶的活性在增加作用，激活了淀粉酶，淀粉酶迅速把淀粉分解成麦芽糖和葡萄糖，滴加碘液时，溶液显浅黄色，而对照组显示红棕色，表明淀粉被分解成了糊精，在1号中，溶液中的淀粉没有被分解遇碘变蓝，通过对比1和3号，2和3号，由颜色的变化，判断淀粉水解程度为1℃水浴中准确保温5min后取出，向两支测定管分别迅速加入4mlNaOH,以终止酶的活性，然后准备下步糖的测定。3.两种淀粉酶总活性的测定　　取上述酶液5ml于100