流式基本原理.pdfVIP

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1 ,流式细胞术原理-检测方式 前向角散射光 (FSC, Forward 使用荧光标记的单克隆 Scatter) 抗体染色,做多色分析 细胞相对大小及其表面积 荧光信号的强弱,反映 侧向角散射 (SSC, Side Scatter) 了细胞抗原的表达含量 细胞粒度及细胞内相对复杂性 2 ,流式细胞术原理–计数 白细胞分型: 单一平台下的细胞计数 FSC vs. SSC CD45 vs. SSC CD45 vs. SSC Eosinophils Granulocytes Monocytes Platelets Lymphocytes 计算每毫升原始血液样本中四种不同细胞群的绝对细胞数量 CD45 vs. Volume 3 群体 SSC Gate 细胞数量r Pulled (mL) 样本体积(mL) Cells x10 /mL 正常范围 淋巴细胞 P5 60,827 308.1 2,100 4.15 0.8 - 5.0 单核细胞 P6 1,154 308.1 2,100 0.08 0.1 - 1.0 粒细胞 P7 26,618 308.1 2,100 1.81 1.4 - 7.5 红细胞 P3 2,478 308.1 2,100 0.17 0.0 - 0.4 3 ,流式细胞术原理–细胞周期 • DNA量的周期变化检测核酸染料标记(如PI) • 特异周期调节蛋白检测如CDK (细胞周期蛋白

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