肿瘤细胞生物学课件.ppt

溶酶体与肿瘤的关系 致癌物质引起细胞分裂调节机能的障阻及染色体畸变，可能与溶酶体释放水解酶的作用有关； 某些影响溶酶体膜通透性的物质，如巴豆油，某些去垢剂、高压氧等，是促进致癌作用的辅助因子，也能引发细胞的异常分裂； 在核膜残缺的情况下，核膜对核的保护丧失，溶酶体可以溶解染色质，而引起细胞突变； 溶酶体代谢过程中的某些产物是肿瘤细胞增殖的物质基础； 致癌物质进入细胞，在与染色体整合之前，总是先贮存在溶酶体中，这已为放射自显影所证实。 内质网 内质网在抑制肿瘤发生中扮演重要角色： 美国密歇根大学、加州大学旧金山分校等机构的研究人员发现HRASG12V在癌症发生中参与一种迅速的细胞周期停滞，这种停滞与ER的大面积真空和扩张有关 ，他们认为内质网是肿瘤控制的一个“守门员”的直接功能。 细胞器与抗肿瘤治疗 线粒体治疗 肿瘤细胞通过内吞方式摄入金纳米棒，接着被转运到内吞体和溶酶体，进而改变了溶酶体膜的通透性而被释放到胞浆，然后靶向运输到线粒体，引起线粒体膜电位降低，最终导致肿瘤细胞的死亡。 与溶酶体相关的治疗 高频热疗：高热使癌细胞中溶酶体的活性升高，加速癌细胞的死亡 核糖体失活蛋白（Ribosome Inactiviting Proteins,RIPs）是一类重要的天然抗癌活性成份，广泛存在于植物界，如蓖麻蛋白、天花粉蛋白、苦瓜蛋白等 与核糖体相关的治疗 与内质网相关的治疗 内质网酶——ENTPD5在原代人类肿瘤样品，以及细胞系中，伴随着AKT的增长而增加研究人员通过一系列实验证明ENTPD5是PI3K/PTEN作用途径中的一部分，因此能作为一种潜在的抗肿瘤治疗靶标。 NORs功能：编码rRNA NORs中心形成核仁 NORs与肿瘤 核仁组织区嗜银蛋白（AgNOR）：判别细胞核中rDNA转录活性的一个指标，可通过测定核仁银染面积与核面积的比值说明其嗜银的强度，区分肿瘤良、恶性病变或判断肿瘤预后的指标。 胸腔积液中的恶性细胞-核仁组成区嗜银蛋白染色 恶性肿瘤中AgNOR颗粒明显增多且大小形态不规则性 （4）端粒和端粒酶 2009年生理医学奖 三位美国科学家Elizabeth H. Blackburn Carol W. Greider Jack W.因在端粒和端粒酶如何保护染色体方面的发现而获奖。 解决的生物学中的一个重大问题——细胞分裂期间染色体如何被完整复制，以及染色体如何得到保护不至退化。 如果端粒变短，细胞就会衰老。相反，如果端粒酶活性很高，端粒长度就会维持，细胞衰老就会延迟，在癌细胞中就是这种情形，可被认为具有永生。 染色体端部的特化部分 端粒的结构 端粒由高度重复的短序列串联而成，在进化上高度保守，不同生物的端粒序列都很相似 保护染色体完整性和维持染色体的稳定性 端粒的功能 保护染色体不被核酶降解；不具端粒的染色体末端有粘性，会与其它片段相连或两端相连而成环状 维持细胞的复制能力 起细胞分裂计时器的作用，端粒核苷酸复制和基因DNA不同，每复制一次减少50-100bp，其复制要靠具有反转录酶性质的端粒酶来完成，正常体细胞缺乏此酶，故随细胞分裂而变短，细胞随之衰老。 端粒酶最早是在四膜虫(Tetrahymena)中发现的。1985年，Blackbaurn 和Greider发现人工合成四膜虫端粒的DNA片段(TTGGGG)4，可被四膜虫细胞抽提物中的一种活性物质加长，这种活性物质对热、蛋白酶K和RNA酶都敏感。 端粒酶（telomerase）的发现 一种能够催化延长端粒末端的核糖核蛋白(RNP), 由RNA和相关蛋白组成。能够以自身携带的RNA为模板, 逆转录合成端粒DNA并添加于染色体末端,从而维持端粒长度的稳定。人端粒酶的RNA组分由450个核苷酸组成。 端粒酶的概念 端粒酶RNA模板序列 端粒酶的功能 经典测定方法： 组织匀浆 测定细胞提取物将端粒片段延长至引物3’端的能力 端粒酶的活性测定 改进的测定方法 端粒重复序列扩增法（TRAP）：PCR机制 TRAP-Ag染法检测HeLa细胞端粒酶活性 共有四种染色法：同位素法、染色法、荧光法和ELISA法 地高辛掺入法：端粒DNA合成功能 细胞原位杂交检测法： 检测RNA和活性亚单位RNA 电化学发光扩增方法 基于磁珠和纳米粒子的电化学发光扩增方法检测端粒酶活性 hTR：人端粒酶RNA 端粒酶蛋白 癌基因和抑癌基因 细胞分化及细胞周期 端粒长度 端粒酶的活性调节 早期肿瘤诊断的标志物 癌组织中端粒酶的表达特点： 表达阳性率很高，除少数肿瘤外