分子生物学原理核酸结构与功能课件.ppt

第三章核酸的结构与功能Nucleic Acid structure and Function;什么是核酸?;核酸的结构与功能;;核酸研究的历史;核酸研究的历史;核酸研究的历史;DNA is the carrier of genetic information;核 苷 酸 的 结 构 ;Ribose and Deoxyribose;第一节 核酸的化学组成;;核酸的化学组成;The structure of base; ; 碱基的共轭双键;Ribose and Deoxyribose;pentose;核苷是碱基与戊糖以糖苷键相连接形成的化合物：; 核苷或脱氧核苷与磷酸通过酯键相连接分别构成 核苷酸或脱氧核苷酸 按组成分类： 含有1个磷酸基团的核苷酸称为核苷一磷酸（NMP），如CMP 含有2个磷酸基团的核苷酸称为核苷二磷酸（NDP），如GDP 含有3个磷酸基团的核苷酸称为核苷三磷酸（NTP），如ATP ;核苷酸;核苷酸的连接方式;;第二节核酸的一级结构;核苷酸的连接; DNA的一级结构是通过3’,5’-磷酸二酯键构成一个没有分支的线性大分子，其两个末端分别是5’-末端（游离磷酸基）和3’-末端（游离羟基）。是指DNA分子中核苷酸的排列顺序。 由于脱氧核苷酸之间的差别仅是其碱基的不同，所以DNA分子碱基的排列顺序就代表了核苷酸的排列顺序。 ;5’;核酸的书写方法;第三节 DNA的空间结构与功能;Chargaff 规则;Date;DNA的双螺旋结构;Date;;Date;Date;Date; DNA的双螺旋结构;;;;;Date;DNA的三级结构;DNA的三级结构;DNA的三级结构;Date;Date; DNA的功能;;生物体内DNA的大小;第四节 RNA的空间结构与功能;;一、信使RNA（ mRNA）;;mRNA的结构特点：;;m7GpppG;mRNA的功能;二、转运RNA（ tRNA） tRNA的结构特点： tRNA分子中含有较多的稀有碱基：DHU、ψ和mG、 mA等 所有的tRNA均是线性多核苷酸链，局部片断由于碱基互补而形成局部双螺旋区，而非互补区则形成环状结构。整个tRNA的二级结构呈现三叶草结构 tRNA中的3个环分别是DHU环、TψC环和反密码环 tRNA的三级结构呈现倒L型，一端为氨基酸臂，另一端为反密码子 ;tRNA的功能;tRNA的三叶草结构;tRNA的三级结构;三、核蛋白体RNA( rRNA) rRNA与蛋白质结合形成的核蛋白是细胞内蛋白质合成的场所。 rRNA 分子大小不均一，真核细胞的rRNA有4种，其沉降系数分别为28S、58S、5S和18S。大约与70种蛋白质结合而存在于的核蛋白体的大小亚基中 rRNA的二级结构为茎环样结构。 ;Date;;四、核酶(ribozyme);第五节核酸的理化性质及其应用; 核酸的一般性质 核酸分子通常表现为较强的酸性。 由于DNA分子细长，其在溶液中的粘度很高；RNA分子比DNA短，在溶液中的粘度低于DNA。 ? 核酸的紫外线吸收 核酸分子中的碱基都含有共轭双键，在260nm波长处有最大紫外光吸收。 蛋白质在280nm波长处有最大吸收，所以可利用溶液260nm和280nm处吸收光度（A）的比值来估计核酸的纯度。 ;DNA的理化性质及其应用;DNA的理化性质及其应用;核酸的变性与复性 （一）变性 DNA变性是指在某些因素的作用下，维系DNA双螺旋的次级键发生断裂，双螺旋DNA分子被解开成单链的过程。 引起DNA变性的因素有加热和化学物质的作用。 变性可使其粘度下降和紫外吸收值的改变等。 2．增色效应和解链温度（Tm）。;变性和复性;变性与复性;增色效应和减色效应;;杂交; 核酸分子杂交是根据两条核酸单链在一定条件下可按碱基互补原则退火形成双链的原理，用已知的单链核苷酸片段作为探针检测样本中是否存在与其互补的同源核酸序列的方法。 ? 常用的核酸分子杂交方法： Southern 印迹杂交、Northern 印迹杂交 斑点杂交、狭缝杂交 原位杂交（菌落原位杂交、细胞原位杂交、 组织片原位杂交） 夹心杂交;Date;Date;探针;探针;第六节 核酸酶限制性内切酶的应用;小 结