(公开课)动物细融合与单克隆抗体.pptVIP

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番茄-马铃薯 (理想图) 1975年的实验室 一个美丽的发现 每个B淋巴细胞——只能分泌一种特异性抗体 2.2单克隆抗体的应用 【例1】能使动物细胞融合的特有的诱导因子是 ( ) A.离心 B.灭活的病毒 C.电刺激 D.振动 【例2】融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点( ) A.具有原来两个或多个细胞的遗传信息 B.能无限增殖 C.可形成新个体 D.培养过程会贴壁 【例3】科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交细胞,经培养可产生大量的单克隆抗体,与骨髓瘤细胞融合的是( ) A.经过免疫的B淋巴细胞 B.不经过免疫的T淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞 D.不经过免疫的B淋巴细胞 【例4】用动物细胞工程技术获取单克隆抗体,下列实验步骤中错误的是( ) A.将抗原注入小鼠体内,获得能产生抗体的B淋巴细胞 B.用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞 C.用聚乙二醇作诱导剂,促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合 D.筛选杂交细胞,并从中选出能产生所需抗体的细胞群,培养后提取单克隆抗体 单克隆抗体: 单个B细胞克隆产生的化学性质单一、特异性强的抗体 * * 主讲: 窦 辉 班别:高二(22)班 有梦想,才会有创造! 人—鼠 (想像图) 如何实现人、动物之间 细胞的融合呢? A细胞 B细胞 人工诱导 1.1动物细胞融合的概念 杂交细胞 动物细胞融合(也称细胞杂交):是指两个或多个细胞融合形成一个单核细胞的过程。 诱导方法 物理法: 化学法: 生物法: 灭活的病毒(特有的方法) 原理: (与植物细胞融合的基本原理相同) 离心、电激、振动 聚乙二醇(PEG) 细胞膜的流动性 灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面 细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接 细胞融合,形成杂交细胞 (细胞膜具有一定的流动性) 1.2动物细胞融合过程 保留融合活性 为什么灭活的病毒能作诱导剂? 灭活丧失感染性 1.3动物细胞融合技术的意义和应用 突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能 成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段 意义: 应用: 制备单克隆抗体(最主要的应用) 从动物的血清中分离抗体 该法制备抗体的缺点: 抗体的传统生产方法 抗原 反复注射动物 产量低 纯度低 特异性差 灵敏度低 怎样大量获得单一抗体 进行无性繁殖(克隆) 体外培养的细胞不能无限增殖 ? 癌细胞 但是 既能产生特异性抗体, 又能大量增殖的细胞 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖 杂交瘤细胞 动物细胞培养技术 动物细胞融合技术 单克隆抗体 你的设想 既能产生特异性抗体, 又能大量增殖的细胞 BB 、B瘤 、瘤瘤 (B、瘤) (一选)选择性培养基:只有杂交瘤细胞才能存活 (二选):选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞 √ 体外培养 小鼠腹腔内培养 目的: 获得产生相应抗体的B细胞 诊断试剂——最广泛应用 准确、高效、简易、快速 单克隆抗体最主要的优点: 特异性强 灵敏度高 并能大量制备 “生物导弹” =单克隆抗体+药物 单抗导向,药物为弹头 治疗疾病和运载药物 主要用于治疗癌症治疗,单克隆抗体作为载体,运载抗癌药物,形成“生物导弹”,准确杀伤癌变细胞。 两个过程 动物细胞融合过程 单克隆抗体制备过程 三个“一” 一个诱导细胞融合的新方法 --灭活病毒 一个新细胞--杂交瘤细胞 一个优势--单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势 B A A B × ① 15、右图为某同学根据杂交瘤技术的方法,设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。据图回答:   (1)该方案能达到预期效果吗?   。原因是     ______________________________________________。   (2)图中②为    过程,常用     作为诱导剂。该细胞继承了_____________________   ,因此不仅能分泌  ___________,还有     本领。 不能 没有将抗原注入小

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