一种云斑天牛气味结合蛋白的分离纯化-南京林业大学学报.PDFVIP

第４０卷　 第４期 南京林业大学学报（自然科学版） Ｖｏｌ．４０，Ｎｏ．４ ２０１６年７月 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎａｎｊｉｎｇ Ｆｏｒｅｓｔｒｙ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ （Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ Ｅｄｉｔｉｏｎ） Ｊｕｌ．，２０１６ － ｄｏｉ：１０．３９６９／ ｊ．ｉｓｓｎ．１０００ ２００６．２０１６．０４．０２６ 一种云斑天牛气味结合蛋白的分离纯化 １ １∗ ２ １ １ ３ １ 卓志航 ，杨　 伟 ，徐丹萍 ，杨春平 ，杨　 桦 ，刘臣山 ，谢婷婷 （１． 四川农业大学林学院，四川　 温江　 ６１１１３０；２． 四川农业大学食品学院，四川　 雅安　 ６２５０１４； ３． 成都农业科技职业学院农学院，四川　 温江　 ６１１１３０） 摘要：为揭示云斑天牛（Ｂａｔｏｃｅｒａ ｌｉｎｅｏｌａｔａ Ｃｈｅｖｒｏｌａｔ）对气味分子的识别机制，通过荧光结合试验和葡聚糖凝胶 Ｇ７５（Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ７５）层析研究了云斑天牛对气味分子的识别情况，并对云斑天牛气味结合蛋白进行了分离纯化。 － － － － － － － 结果表明，云斑天牛气味结合蛋白能与荧光探针Ｎ 苯基 １ 萘胺（Ｎ ｐｈｅｎｙｌ １ ｎａｐｈｔｈｙｌａｍｉｎｅ，１ ＮＰＮ）产生荧 － － 光结合，云斑天牛触角部位的总蛋白提取液中存在ｐｒｏ． Ⅰ Ⅻ（Ｐｒｏｔｅｉｎ Ⅰ Ⅻ）１２种大分子粗提蛋白，这 １２种大 － － 分子粗提蛋白经Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ７５纯化后，得到１种能与荧光探针１ ＮＰＮ产生荧光结合的纯化蛋白ｐｕｒ ｐｒｏ． Ｉ（ｐｕ⁃ － ｒｉｆｉｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ Ｉ）。 纯化蛋白ｐｕｒ ｐｒｏ． Ｉ分子质量约为１５．２ ｋｕ，对应为大分子粗提蛋白ｐｒｏ． Ⅻ（Ｐｒｏｔｅｉｎ Ⅻ）。 鉴定 － 认为，分离纯化蛋白ｐｕｒ ｐｒｏ． Ｉ是云斑天牛的一种气味结合蛋白。 关键词：云斑天牛；气味结合蛋白；葡聚糖凝胶Ｇ７５；蛋白分离纯化；荧光探针 － － － 中图分类号：Ｑ９６９．５５１．４；Ｓ７１８．７　 　 　 　 　 　 　 文献标志码：Ａ 文章编号：１０００ ２００６（２０１６）０４ ０１６４ ０７ Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ａｎ ｏｄｏｒａｎｔ ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ ｆｒｏｍＢａｔｏｃｅｒａ ｌｉｎｅｏｌａｔａ Ｃｈｅｖｒｏｌａｔ １ １∗ ２ １ １ ＺＨＵＯＺｈｉｈａｎｇ ，ＹＡＮＧ Ｗｅｉ ，ＸＵ Ｄａｎｐｉｎｇ ，ＹＡＮＧ Ｃｈｕｎｐｉｎｇ ，ＹＡＮＧ Ｈｕａ ，