HPLC操作须知馒头版.pptVIP

高效液相色谱仪操作须知 目 录 1 仪器安装条件及注意事项 2 操作使用注意事项 2.1 流动相使用的注意事项 2.2 流动相的更换 2.3 储液器的注意事项 2.4 管路连接的注意事项 2.5 基本操作注意事项 3 各单元日常维护 3.1 色谱柱的保养事项 3.2 手动进样阀的维护注意事项 3.3 高压恒流泵的维护注意事项 3.4 紫外检测器的维护注意事项 1、仪器安装条件及注意事项 1) 安装本仪器的实验台应水平，稳固，并具有足够的放置空间； 2) 避免在具有腐蚀性气体、大量灰尘或能产生强磁场的地方安装本仪器，否则将会影响仪器的正常运转并且缩短仪器使用寿命； 3) 由于仪器所用溶剂是易燃并有毒，故安装设备的房间应彻底通风，且具有向外排风的装置，否则会引起中毒或身体不适，也会引起火灾； 4) 应安装四个以上三芯电源插座（220V, 5~10A）,必须具有专门的接地线（注意，绝不能将电源线的中线作为接地线），并确保仪器电源的电压稳定，否则会导致仪器的不正常运作； 5) 如果实验室无专用的接地线，一般可用Φ15~20mm的铜棒打入地下 1~1.5米，用Φ1.2mm左右的塑胶单股导线连接到电源插座的接地端。 6) 如实验室电压不稳，应使用稳压器等必要设备，使电源电压稳定。 7) 实验室的室温尽可能控制在15℃-30℃范围内，并且波动要小；湿度在45%-85%范围内； 8) 空调或其他设备产生的气流不要直吹仪器，避免光线直射及振动； 9) 仪器启动顺序：先开高压恒流泵和紫外检测器，待紫外检测器自检完毕，回到默认波长254nm后，打开工作站软件； 10) 仪器关闭顺序：先按泵停止，关闭氘灯，退出工作站软件，然后再关仪器。 11) 仪器应由专人负责，如果使用人员不固定，请准备《仪器使用登记本》，以明确使用情况，及时处理和保养。 2 、操作使用注意事项 2.1 流动相使用的注意事项 几中脱气方法比较： 1） 氦气脱气法：利用液体中氦气的溶解度比空气低，连续吹氦脱气，效果较好，但成本高。 2） 加热回流法：效果较好，但操作复杂，且有毒性挥发污染。 3） 抽真空脱气法：易抽走有机相。 4） 超声脱气法：流动相放在超声波容器中，用超声波震荡10-15分钟，此法效果较差，但操作简单。 如果管路中使用peek树脂部件，请不要使用下列流动相： 浓硫酸、浓硝酸、二氯乙酸、丙酮、四氢呋喃、二氯甲烷、氯仿和二甲基亚砜。 特别注意： 含有缓冲盐溶液的流动相的清洗方法： 先用5：90的甲醇/水溶液冲洗1小时以上，以洗去缓冲盐； 再逐渐加大甲醇/水溶液中甲醇的比例，冲洗系统，最后将系统保存在纯甲醇流动相中。清洗的时间至少为1小时。 2.2 流动相的更换 在分析过程中，有时需要更换流动相进行分析。一定要注意前一种使用的流动相和所更换的流动相是不是能够相溶。如果前一种使用的流动相和所更换的流动相不能够相溶，那您就要特别注意了。要采用一种与这二种需更换的流动相都能够相溶的流动相进行过渡、清洗。较为常用的过渡流动相为异丙醇，但实际操作中要看具体情况而定，原则就是采用与这二种需更换的流动相都能够相溶的流动相。一般清洗的时间为30-40分钟，直至系统完全稳定。 如不进行上述“特别注意”步骤的操作，将会导致系统管路堵塞。严重时将引起流通池污染堵塞，不得不更换流通池。用户就要承担不必要的损失了。 2.3 储液器的注意事项 保持流动相储液器的清洁是保证仪器正常使用的关键。所以储液器必须清洗干净才能使用。 必须使用HPLC级的溶剂。如使用的试剂中含有缓冲盐或者使用非HPLC级的流动相，一定要用0.45μm滤膜过滤，去除其中的微粒物质。 2.4 管路连接的注意事项 1） 将管子完全插入开口端，直至其与开口端的末端相碰为止。否则将产生死体积，引起峰展宽。 2） 为了使柱外效应减到最小，获得理想的分析结果，尽量使用管径细的管路作为连接。 3） 管路接头不要拧的过紧，以防损坏螺纹。 4）使用PEEK管件需注意： PEEK对卤代烷烃和四氢呋喃的兼容性不好。虽然未观察到上述溶剂溶解PEEK材料的明显迹象，但PEEK遇到上述溶剂会变脆。 5）不锈钢管耐受压力限为6000psi；PEEK管耐受压力限近4000psi 。 2.5 基本操作注意事项 泵运行前先打开排空阀，用注射器抽出流动相，观察10秒，流动相应连续流出。 不用排空阀时应将其关闭，否则大气压力会使流动相从排空阀出口流出。 在使用仪器过程中，注意贮液瓶里的流动相是否够用，如快用尽，应及时更换。 更换流动相时务必停泵，防止吸入大量空气，影响仪器正常运作。 在启动分析进样时，请快速板动7725i进样阀，否则会引起系统压力突跳，影响仪器的使用寿命。 如