乙基－2－氯乙酰苯胺水解酶活性的方法.pdfVIP

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2019-05-25 发布于天津
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－生态与农村环境学报　２０１６，３２（４）：６８２６８６　ＪｏｕｒｎａｌｏｆＥｃｏｌｏｇｙａｎｄＲｕｒａｌＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ－－－－－一种检测２′ 甲基６′ 乙基２氯乙酰苯胺水解酶活性的方法１，２２２２① 王　飞，李周坤，董维亮，崔中利　（１江西省农业微生物资源开发与利用工程实验室／江西农业大学生物科学与工程学院，江西南昌　３３００４５；２南京农业大学生命科学学院／农业部农业环境微生物工程重点开放实验室，江苏南京　２１００９５）－－－－－－摘要：建立了一种快速测定ＤｅｌｆｔｉａａｃｉｄｏｖｏｒａｎｓＴ３６菌株２′ 甲基６′ 乙基２氯乙酰苯胺（ＣＭＥＰＡ）水解酶活性－１－１－－－－的方法。在２０ｍｍｏｌ ·ＬＴｒｉｓＨＣｌ（ｐＨ值为７０）缓冲液中，１０～５０ μｍｏｌ ·Ｌ的ＣＭＥＰＡ水解产物２甲基６乙－基苯胺（ＭＥＡ）在铁氰化钾催化下与４氨基安替比林反应生成紫红色物质，该物质在５３５ｎｍ处的吸光度（ｙ）与２＝－＝ＭＥＡ浓度（ｘ）呈正相关（ｙ００１４６ｘ０００５４，Ｒ０９９８８）。底物ＣＭＥＰＡ、十二烷基硫酸钠（ＳＤＳ）、甲醇等有机－１－试剂以及１ｍｍｏｌ ·Ｌ金属离子对显色反应无显著影响，温度和ｐＨ值对显色反应影响显著。４氨基安替比林显－－色法对菌株Ｔ３６粗酶液酶活性的测定结果与二氯甲烷萃取紫外分光光度法无显著差异。该方法也适用于其他苯胺苯酚类衍生物的测定。－－－－－关键词：２甲基６乙基苯胺（ＭＥＡ）；４氨基安替比林显色法；分光光度法；ＤｅｌｆｔｉａａｃｉｄｏｖｏｒａｎｓＴ３６－－－中图分类号：Ｘ５９２　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１６７３４８３１（２０１６）０４０６８２０５－ＤＯＩ：１０．１１９３４／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３４８３１．２０１６．０４．０２６