利福平对小鼠的肝毒性及胆酸代谢基因的影响.PDFVIP

中国药理学通报　ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ　２０１６Ｊｕｎ；３２（６）：８４１～５ ·８４１· 网络出版时间：２０１６－５－２５１５：３９　网络出版地址：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／３４．１０８６．Ｒ１５３９．０４０．ｈｔｍｌ 利福平对小鼠的肝毒性及胆酸代谢基因的影响 徐永吉，李文楷，刘　杰，陆远富 （遵义医学院基础药理省部共建教育部重点实验室，贵州 遵义　５６３０００） ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－１９７８．２０１６．０６．０２０ 子机制未见有文献明确的阐述。本文通过给予小鼠 文献标志码：Ａ 文章编号：１００１－１９７８（２０１６）０６－０８４１－０５ －１ －１ １８０ｍｇ·ｋｇ ３０ｄ与９０ｍｇ·ｋｇ ９０ｄ的利福平，观 中国图书分类号：Ｑ４８５；Ｒ３３２；Ｒ３３３．４；Ｒ９６１ 察利福平的肝毒性，并且检测其对肝脏胆汁酸代谢通 摘要：目的　观察利福平长期给药引起小鼠的肝损伤及其对 路上相关基因的影响。 胆汁酸代谢通路相关基因的影响。方法　１ｄ１次灌胃给予 １　材料与方法 －１ ♂昆明种小鼠１８０ｍｇ·ｋｇ 利福平连续 ３０ｄ与９０ｍｇ· １．１　药品与仪器　利福平胶囊（成都锦华，批号： －１ ｋｇ 利福平连续９０ｄ；麻醉取血、肝脏，称肝重，检测血清谷 １３１００６）；ＡＬＴ测定试剂盒 （南京建成，批号： 丙转氨酶（ＡＬＴ），观察肝脏组织的病理变化；提取肝脏总 ；ＴＲＩｚｏｌ（大连宝生物公司）；逆转录试剂 ＲＮＡ并采用ＲＴＰＣＲ法检测胆汁酸代谢相关基因ｍＲＮＡ的 盒（ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓ公司）；ＳＹＢＲＧｒｅｅｎ预混液 表达情况，提取肝脏总蛋白并采用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测相关 －１ （美国ＢＩＯＲＡＤ公司）；实时荧光定量ＰＣＲ仪（美国 蛋白的表达。结果　连续给予利福平 １８０ｍｇ·ｋｇ ３０ｄ和 －１ ＢＩＯＲＡＤ公司，型号：ＣＦＸｃｏｎｎｅｃｔ）；多功能梯度 ９０ｍｇ·ｋｇ ９０ｄ，小鼠肝重系数增加，肝脏发生明显病理改 变，表现为肝细胞水肿、羽毛样变性与脂肪变性，且利福平 ＰＣＲ仪（德国Ｅｐｐｅｎｄｏｆｆ）；ＣｈｅｍｉＤｏｃＸＲＳ化学发光 －１ －１ 成像系统（美国ＢＩＯＲＡＤ公司）；ＣＹＰ７Ａ１抗体（ａｂ １８０ｍｇ·ｋｇ ３０ｄ病理改变较严重；连续给药１８０ｍｇ·ｋｇ 利福平 ３０ｄ可使胆酸代谢基 因胆 固醇 ７羟化酶 ｃａｍ公司，ａｂ６５５９６，兔多克隆抗体）；ＢＳＥＰ抗体（ａｂ α （ＣＹＰ７Ａ１）、法尼醇受体（ＦＸＲ）、小分子异源二聚体伴侣 ｃａｍ公司，ａｂ１１２４９４，兔多克隆抗体）；ＴｈｅｒｍｏＢｉｓ （ＳＨＰ）表达增加，胆盐输出泵（ＢＳＥＰ）的表达降低；连续给药 Ｔｒｉｓ凝胶等。 －１ ９０ｍｇ·ｋｇ 利福平９０ｄ，仅可发现胆酸代谢基因胆固醇７ α １．２　实验动物与分组　健康 昆明种小鼠，体质量 ♂ 羟化酶（ＣＹＰ７Ａ１）表达增加。结论　利福平对小鼠具有明