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- 2019-05-03 发布于江西
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基因转移技术 生技30802 龚凯 概述 运用物理、化学或生物学的方法和技术将外源基因转移到受体细菌或者细胞内,并使之在细菌或细胞内实现转入基因的扩增好表达称为基因转移技术。它是重组DNA技术和基因治疗的关键步骤之一。 两个概念 转化:质粒DNA或其他载体与目的基因DNA构建的重组载体导入宿主细胞的过程。 转染:噬菌体,病毒或以其他作为载体构建的重组载体导入宿主细胞的过程。 基因转移技术的应用 外源基因与载体在体外重组形成重组DNA分子后,为了分析基因的表达,测定表达对细胞生长的影响,研究该基因的结构与功能,得到高表达的基因产物,通常需要将重组DNA分子通过特定的方法导入宿主细菌(细胞)。 基因转移技术的分类: 第一类是将目的基因转导入体外培养的细胞或导入从体内取出的细胞,观察目的基因在细胞中的表达,这项技术称基因转染(gene transfection )技术。通常情况下,该技术转入的目的基因不与细胞染色体发生整合,而是在细胞质呈现暂时性表达,随时间推移而逐渐减弱或消失。为了使目的基因进入细胞后能与细胞基因组DNA发生整合、产生永久性的表达,需用病毒载体将目的基因导入细胞,并发生整合; 第二类是将已克隆的目的基因导入受精卵,并将导入基因后的受精卵植入子宫,发育成胚胎和个体,胚胎期和出生后均可观察目的基因在整体内的表达,此项技术称转基因技术(transgenic te
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