利用光学成像系统非侵入性监测乳腺癌细胞在骨.pdf

164 中国医药生物技术 2012 年 6 月第 7 卷第 3 期 Chin Med Biotechnol, June 2012, Vol. 7, No. 3 DOI:10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2012.03.002 ·论著· 利用光学成像系统非侵入性监测 乳腺癌细胞在骨环境内的生长情况 严伟，金芳纯，范启明，汤亭亭 【摘要】 子信号，是检测实验动物体内细胞及分子机制的强 目的 应用稳定表达红色荧光蛋白的人乳腺癌 MDA-MB- 有力手段，在当前欧美等发达国家已被广泛地应用 231SArfp 细胞系，建立乳腺癌骨移植瘤动物模型，并应用 于感染、肿瘤免疫及治疗、基因治疗、自身免疫性 活体成像技术检测肿瘤的生长情况。 疾病、药物开发等生物医学领域[8, 11-14] 。 方法 注射 MDA-MB-231SArfp 细胞于 BALB/c 雌性裸 与生物发光技术相比，荧光成像技术具有标记 小鼠胫骨髓腔，应用活体光学成像系统，连续观察肿瘤细胞 靶点的多样性、一次可以应用不同的荧光基因标记 在体内的生长情况，同时测量肿瘤体积的变化；4 周和 7 周 不同的细胞的优势，因而在分子生物学研究和观察 时拍摄 X 线片并做组织学检查，评估肿瘤对骨组织的 小分子体内代谢（如肿瘤细胞、免疫相关细胞）等 影响。 方面已经广泛应用。目前常用的荧光基团以表达绿 结果 利用活体光学成像系统监测发现，至第 3 ~ 4 周期 色荧光蛋白（green fluorescent protein，GFP ）和红 间，肿瘤进入对数生长期；肿瘤大小与荧光信号强度呈线性 色荧光蛋白（red fluorescent protein ，RFP ）为代表， 无需底物即可自发荧光，对细胞几乎无毒性。 正相关。X 线片和组织切片显示 MDA-MB-231SArfp 细胞 形成溶骨性的骨破坏。 本实验利用稳定表达红色荧光蛋白（RFP ）的 人乳腺癌 MDA-MB-231SArfp 细胞系，通过裸鼠 结论 成功建立了可非侵入性监测的乳腺癌骨移植瘤模型， 胫骨髓腔注射，建立乳腺癌骨移植瘤动物模型，利 利用活体光学成像系统结合 X 线片及组织学检查能够直 用活体荧光成像技术对此模型内的肿瘤生长进行 观、连续、准确地检测肿瘤细胞在骨环境内的生长情况，为 非侵入性的连续监测，同时进行 X 线片、组织切 后续抗肿瘤药物的筛选和评价提供了新的手段和工具。 片的检查，发现乳腺癌细胞在骨环境内的生长规 【关键词】 乳腺肿瘤； 疾病模型，动物； 诊断显像； 律，为后续在动物体内进行抗乳腺癌骨转移药物研 荧光 X 线摄影术 究奠定基础。 中国医药生物技术, 2012, 7(3):164-170 1 材料和方法 活体光学成像技术，包括生物发光与荧光成像 1.1 材料 技术，目前已成为医学、生物学及药物开发等研究 1.1.1 细胞株及培养 RFP 标记的乳腺癌细胞