实验报告-循环免疫复合物的检测.docxVIP

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  • 2019-05-05 发布于贵州
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实验报告:循环免疫复合物的检测   Ⅲ型超敏反应的发生主要是由循环免疫复合物引起,通过检测CIC可以证实某些疾病是否与Ⅲ型超敏反应有关,也可帮助分析判断疾病的进程及转归。抗原特异性免疫复合物的检测抗原特异性免疫复合物的检测是通过检测免疫复合物中抗原特异性来检测CIC.优点是特异性高,通过检测可以了解引起免疫复合物病的抗原。但在大多数情况下,免疫复合物中的抗原性质不太清楚或非常复杂,所以抗原特异性方法并不常用。抗原非特异性免疫复合物的检测抗原非特异性免疫复合物的检测仅是检测血清中循环免疫复合物,方法很多,参见有关章节。临床意义判定免疫复合物为发病机制的证据有三:①病变局部有IC沉积;②CIC水平显著升高;③明确IC中的抗原性质。第三条证据有时很难查到,但至少要具备前两条,单独CIC的测定不足为凭。人体在健康状态下也存在少量的CIC,其生理与病理的界限不易区分。另外,CIC检测的方法太多,其原理各不相同,用一种方法测定为阳性,另一种方法检测可能为阴性;但与免疫组化法一起检测,其意义就大得多。目前已经明确系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、部分肾小球肾炎和血管炎等疾病为免疫复合物病,CIC检测对这些疾病仍是一种辅助诊断指标,对判断疾病活动和治疗效果也有一定意义。在发现紫癜、关节痛、蛋白尿、血管炎和浆膜炎等情况时,可考虑免疫复合物病的可能性,进行CIC和组织沉积IC的检测。另外,患有恶性肿瘤时CIC检出率也增高,但不出现Ⅲ型变态反应的损伤症状,称之为临床隐匿的IC病,然而这种状态常与肿瘤的病情和预后相关。   免疫复合物:抗原与其相应抗体结合形成   局部免疫复合物:沉积于机体某一局部的免疫复合物   可溶性免疫复合物:游离在体液中的免疫复合物   循环免疫复合物:血液中的免疫复合物   一、循环免疫复合物   抗原和相应抗体结合形成的物质称为免疫复合物,免疫复合物和补体、其他免疫活性物质结合,沉积在血管壁,可导致组织损伤及血管炎,引起一系列的疾病,如红斑狼疮,由于免疫复合物能在循环血液中检测到,故称之为循环免疫复合物。   循环免疫复合物的测定虽无特异性诊断意义,但对病情的活动性判断和指导治疗有一定价值,测定循环免疫复合物的方法很多,这里仅介绍临床常用的两种。   1、聚乙二醇法   循环免疫复合物与聚乙二醇作用,以浊度变化表现出来,可根据浊度的大小来反映免疫复合物的多少。如浊度大,则说明血液中循环免疫复合物增多,病情活动,但是对诊断没有特异性价值。   2、冷球蛋白测定   亦可称冷免疫球蛋白,是在低温自然沉淀,加热后又能溶解的蛋白复合物。当血液中出现冷球蛋白时,称冷球蛋白血症,在红斑狼疮病人中较多见。有时见两小腿部皮下紫癜,而血小板检查正常,这是由于冷球蛋白在皮下沉淀的结果,该方法对判断病情变化和指导治疗有参考价值。   二、相关问题   1、问:“红细胞免疫黏附,清除体内CIC”中的“CIC”是什么意思?   答:循环免疫复合物又称可溶性免疫复合物,分子量为50万~100万,沉降系数~19S,它不易被吞噬细胞吞噬,又不能经肾小球排出,可较长时间在血液中循环,一旦大量循环免疫复合物沉积于组织中,则引起组织损伤及相关的免疫复合物病。   CIC阳性常见于:   部分自身免疫性疾病,如SLE,类风湿关节炎等;   膜增殖性肾炎,链球菌感染后肾炎;   传染病,如慢性乙型肝炎,疟疾,麻风等;   恶性肿瘤。   2、问:我想检测血中的CIC,如果溶血了,测的结果还准吗?   答:我觉得CIC是用免疫的方法测定的,所以我觉得抗原抗体的反应,受溶血的影响比较小。   3、问:笔者在日常工作中,遇到循环免疫复合物检测,检测结果显示CIC浓度较高,想进一步了解是什么性质的CIC,想采用分离剂将其分离,即抗原抗体分离后再检测其抗原或抗体,以进一步确定是什么病原体引起的CIC增高?问题是采用什么分离剂来分离CIC效果比较好?   答:用低pH可 以试试,但是只能在低PH的缓冲体系里是分开的,而且时间不能太长,不然抗体容易失活。如果Ag和Ab的分子量差不少,那可以用分子筛把他们给分开。   循环免疫复合物的沉积   由非肾小球性的内源性或外源性可溶性抗原引起,相应抗体与之在循环中形成免疫复合物,随血液流经肾小球时沉积于局部,继而引起免疫损伤,属m型变态反应。电子显微镜检查时,免疫复合物表现为电子致密物,沉积部位可为系膜区、内皮细胞与基底膜之间(内皮下沉积物)、基底膜与足细胞之间上皮下沉积物)或基底膜内。有时沉积物可同时出现于不同的部位。免疫荧光检查显示沿基底膜或在系膜区出现不连续的颗粒状荧光。免疫复合物在肾小球内沉积后,可被巨噬细胞和系膜细胞吞噬、分解,炎性改变随之消退。如果大量抗原持续存在,免疫复合物不断形成并在肾内沉积,可引起慢性膜性增生性改变

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