小分子抗原酶免疫分析方法研究进展生物通.pdf

中国生物工程杂志 ， ， （）： JK/+* L/7-M6K+77,) %’ %’ 0 ! 0 $$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$ !!!!!!!!!!! ! 综 述 ! ! !!!!!!!!!! 小分子抗原酶免疫分析方法研究进展 杨唐斌# 曾 昆 戴钟铨 曲丽娜 钟 萍 （航天医学工程研究所 北京 !#$ ） 摘要 综述了小分子半抗原酶免疫分析法研究进展，着重介绍了开放式夹心免疫分析法的原理、 应用前景及其生物学意义。 关键词 小分子抗原 非竞争性酶免疫分析法 开放式夹心酶免疫法 定量测定机体内的生理活性物质如类固醇、儿 分离游离的和抗原或抗体结合的酶标记物，又分为 茶酚胺、类花生酸类物质、甲状腺激素、细胞损伤生 均相和非均相酶免疫测定两种类型，均相酶免疫分 物标记物以及合成药物等是生物医学分析的主要 析法是为快速简便检测血液的治疗药物浓度而建 ［］ ［］ ! 任务! ；果蔬中的农药、毒素、毒品以及环境中某些 立起来的一门技术 ，最近该技术也用于大分子抗 ［］ 重金属和病毒会影响机体各种酶的生理活性，降低 原的测定9 。由于方法学上限制，一般说来均相酶 免疫功能，导致“三致”作用（致癌、致畸、致突变）， 免疫法灵敏度不高，但可以实现检测过程的全部自 ［］ ［］ $ 是环境、食品和卫生领域极为关注的问题% 。以上 动化 。 这些物质都是小分子化合物，因此组织化学上也将 非均相酶免疫法具有灵敏度高的优点，又可分 其称为半抗原，仅具有与相应抗原或致敏淋巴细胞 为竞争性和非竞争性酶免疫分析法。竞争性酶免 的免疫反应性，而无免疫原性。对于半抗原的检测 疫分析法主要用于半抗原的检测，被检测抗原和酶 一般采用气相色谱、高压液相色谱、质谱等手段， 标记抗原与限量抗体竞争结合，通过酶标记抗原量 % 多年来免疫学检测方法逐渐显示出其不可替代 的减少估算被检抗原的含量。由于抗体和酶标记 的优势。它不像传统的色谱和质谱等方法那样需 抗原的最小浓度受抗原抗体之间亲和力大小的限 要复杂、昂贵的设备，易操作，前处理过程简单，成 制，而且与抗体结合的酶标记抗原的最小检测量仅 为其初始量的 ，因此该方法半抗原或抗原的检 本低，检测快速、准确、灵敏，可实现高通量、自动化 ’ : 检测，因此具有极为广泛地应用前景。 测限通常只有 ; ! !; =87 。 相反，非竞争性酶免疫分析法检测限则较低， ! 常规酶免疫分析法研究进展与国内现状 主要用于完全抗原的检测，被检抗原先与过量固定 化在某一固相表面的抗体结合，再与过量的酶标记 酶免疫技术是将抗原抗体特异性反应和酶的 抗体反应。因此与抗原结合的酶标记抗体的活性 高效催化