罗格列酮对博莱霉素所致肺动脉高压大鼠肺动脉iNOS表达和iNOS作用的影响-病理学与病理生理学专业毕业论文.docxVIP

河北医科大学 河北医科大学 学位论文使用授权及知识产权归属承诺 攀名词缉师铆00斡罱：涵二了平歹月上7口k圳 河北医科大学 研究生学位论文独创性声明 本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了 文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰 写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写， 文责自负。 研究生躲镧瞬师签名：陈蓖矜 妒多年3月矽日 { 中文摘要罗格列酮对博莱霉素所致肺动脉高压大鼠肺动脉 中文摘要 罗格列酮对博莱霉素所致肺动脉高压大鼠肺动脉 i NOS表达和i NOS作用的影响 摘 要 目的：博莱霉素(bleomycin，BLM)是抗肿瘤的化疗药 物，其主要副作用是引起肺泡炎和肺纤维化。气管内一次性 滴注BLM复制肺纤维化模型已得到国内外公认。肺损伤是 引起肺动脉高压的常见原因。目前对由BLM诱导肺纤维化 过程中肺血管的变化所知甚少。本课题组以往研究结果显 示：气管内滴注BLM后第14天，大鼠出现肺动脉高压， 肺动脉内皮依赖性舒张反应受损；罗格列酮(Rosiglitazone， RSG)一过氧化物酶体增殖活化受体Y(peroxisome prolifertor-actived receptor-Y，PPAR-Y)激动剂能有效地防 治BLM诱导的肺动脉高压。现已知，诱导型一氧化氮合酶 (inducible nitro oxide synthase，iNOS)参与肺动脉高压的形 成，但iNOS在BLM所致的肺动脉高压形成机制中的作用， 尚不清楚。本实验通过观察模型大鼠肺动脉壁iNOS表达、 iNOS在肺动脉血管反应性异常中的作用以及RSG对上述 变化的影响，为阐明BLM诱导肺动脉高压的机制和RSG 的防治机制提供资料。 第一部分罗格列酮对博莱霉素所致肺动脉高压大鼠肺动 脉iNOS表达的影响 方法：选用免疫组织化学方法，观察气管内滴注BLM 中文摘要后第14天，大鼠各级肺动脉iNOS表达和分布的变化及RSG 中文摘要 后第14天，大鼠各级肺动脉iNOS表达和分布的变化及RSG 整体治疗以及离体孵育对肺动脉iNOS表达的影响。 健康雄性SD大鼠36只，体重(160～1809)，随机分为 四组：①NS+NS组大鼠(n_6)：一次性气管内滴入生理盐 水(normal saline，NS，0．5ml／kg)，NS(2ml／d)灌胃14天； ②BLM+NS组(n_1 8)：一次性气管内滴入BLM (5mg／0．5ml／kg)，NS(2ml／d)灌胃14天；@BLM+RSG组 (n=6)：一次性气管内滴入BLM(5mg／0．5ml／kg)，RSG (3mg／kg tt溶于NS2ml／d)灌胃14天；@NS+RSG组(n=6)： 一次性气管内滴入MS(0．5ml／kg)，RSG(3mg／kg·d溶于 NS2ml／d)灌胃14天。 各组大鼠均在气管给药后第14天取材。大鼠在10％水 合氯醛(3ml／kg，ip．)麻醉后，放血处死。将肺动脉及左肺 置于新鲜配置的4％多聚甲醛溶液中固定。BLM+NS组有6 只大鼠的肺动脉立即被置于4％多聚甲醛固定，另12只大 鼠的肺动脉在体外孵育(D姬M培养液，37℃，5％C02) 24小时后被置于4％多聚甲醛中固定。体外孵育分两组：单 纯培养液组(DMEM)和RSG孵育组(DMEM中含RSGl0 la mmol／L)，每组6只大鼠。 固定后的组织经石蜡包埋、切片，用于iNOS免疫组 织化学染色。JEDA．801D形态学图像分析系统计算iNOS 免疫染色阳性的平均光密度值及阳性面积百分比。整体给药 各组肺动脉行HE染色进行形态学观察。 结果：1注BLM大鼠肺动脉主干iNOS的表达及RSG 的影响 NS+NS组肺动脉壁(平滑肌层和内皮)有少量 iNOS表达(平均光密度O．29±0．03，阳性面积6．80±1．80)； 中文摘要NS+RSG组肺动脉壁(内皮和平滑肌层)iNOS表达(平均 中文摘要 NS+RSG组肺动脉壁(内皮和平滑肌层)iNOS表达(平均 光密度O．30±O．01，阳性面积5．90±1．17)与NS+NS组相 比，其差异无统计学意义(胗0．05)。BLM+NS组肺动脉壁 (内皮和平滑肌层)iNOS表达(平均光密度O．39±O．02， 阳性面积16．82±2．42)明显强于NS+NS组(尸O．01)。 BLM+RSG组肺动脉壁(内皮和平滑肌层)iNOS表达(平 均光密度0．33±0．02，阳性面积11．03±2．06)弱于BLM+NS 组(氏O．05)，但仍强于NS+NS组、NS+RSG组(PO．05)。 离体水平RSG孵育组(DMEM+RSGl 0 1．t mmol／L)肺动脉壁 iNOS表达(平均光密度0．32±0．02，阳性面积11．