慢性心力衰竭患者尿液水通道蛋白2的排泄及临床影响因素的研究-心血管内科专业毕业论文.docxVIP

|1Ul |1Ul I I II II Ill U II II IIl Y1 8 1 3006 硕士学位论文 慢性心力衰竭患者尿液水通道蛋白．2的 排泄及临床影响因素的研究 硕士研究生：叶桃春 指导老师：许顶立教授 摘 要 研究背景： 慢性心力衰竭(CHF)已经成为二十一世纪重大的公共卫生问题， 如何结合CHF发生发展的病理生理机制，探讨其发病的早期信号和早期干预方案， 已经成为心血管界研究的热点与难点。 水钠潴留作为CHF重要的病理生理过程，不仅是心源性水肿的最主要发病机 制之一，也是进一步引起心脏损伤和评估预后的重要指标。研究表明，水通道蛋 白2(AQP．2)在CHF水潴留和低钠血症中起了重要作用，CHF大鼠在血液血管加压 素(AVP)增加的同时伴有肾脏AQP一2基因表达的上调，血管加压素2型受体Ⅳ2R) 拮抗剂可以逆转肾脏AQP．2表达的上调。提示CHF水潴留机制为：心输出量和有 效循环血量下降一血循环AVP增加一肾脏集合管V2R激活一AQP-2激活和／或基因 表达上调一水重吸收增加。 研究表明，约有3～4％的AQP．2经尿液排出，并且与肾脏AQP-2表达有良好的 相关性。随着放射免疫定量法(ⅪA)和酶联免疫吸附法(ELISA)检测尿液AQP-2浓 度方法的成熟，临床尿标本收集的也简便易行，因此，检i贝UCHF患者尿液AQP一2 具有较强的实用价值。 目的：以2005年9月至2007年6月于广州南方医院心内科住院患者(共804例)和 健康体检者(共240例)为研究对象，应用间接ELISA方法检测其尿液AQP．2浓度， 分析不同心功能分级、分期，不同类型及合并不同疾病CHF患者尿液AQP．2排泄 情况，以了解不同临床因素对CHF患者尿液AQP．2排泄的影响，进一步探讨尿液 I 中文摘要AQP．2检测的临床意义。 中文摘要 AQP．2检测的临床意义。 方法： 采用前瞻性研究方法，收集CHF患者与健康对照者的晨起尿液，经预处理后 保存备用。人工合成AQP．2蛋白C末端的CELHSPQSLPRGSKA多肽片段，并与牛 血清白蛋白偶联作为标准品，将AQP．2多肽与匙孔血蓝蛋白(KLH)相连后免疫家 兔，获得兔抗鼠AQP．2多克隆抗体。采用间接ELISA方法，检测不同心功能CHF 患者尿液AQP．2水平。本方法灵敏度为56．2fmol／ml，检测健康对照组尿液AQP2／uCr 浓度为128．8士45．3fmol／junol。冰点抑制法检测尿渗量(USM)，氧化酶法检测尿肌酐 (uCr)，放射免疫定量法(RIA)钡tJ定血浆血管加压素(AVP)水平，电化学发光法检测 血浆N端前脑利尿肽(NT．proBNP)浓度。分别计算每一对象尿液 AQP2／uCr(fmol／mn01)浓度。住院患者入院2-3日内完成超声心动图检查，测定同 --,b动周期内心脏左室舒张末内径(LVIDd)、室间隔厚度(IVSd)、左心室后壁厚度 (LVPWd)、左心室射血分数(LVEF)，计算左心室重量(LVM)和左心室重量指数 (LVMI)。其它各常规检查项目，如血常规、肝肾功能等送南方医院检验科检查。 采用SPSSl3．0统计分析软件包分析，如无特别说明，计量资料采用均数q-标准 差(姓s)表示。两组间均数的比较采用两独立样本t检验，方差不齐时采用非参数秩 和检验。三组以上的比较采用单因素方差分析(One．way ANOVA)，各组间的两两 比较采用LSD法。两个可能存在交互效应影响因素分析时采用析因分析。两组间 率的比较采用卡方检验，并用Gamma法进行等级关联度检验；正态分布两计量资 料相关性检验采用Pearson相关分析，非正态或含等级资料时采用Spearman相关分 析；考虑多个变量对结果的影响时，采用偏相关分析，多个危险因素的综合分析 采用多元回归分析，并建立诊断性回归方程。P_0．05认为检验有统计学差异。 结果： 1．CHF患者(n=804)尿液AQP2／uCr水平较正常对照组(n=240)高(1 87．o士94．6 fmol／I．tmol vs．128．8士45．3 fmol／“m01)，两组间比较有显著统计学差异 II 硕士学位论文忙9．62 硕士学位论文 忙9．62 1，P20．ooo)。 2．有症状CHF患者fNVHA II·Ⅳ级，n=414)尿液AQP2／uCr水平高于无症状CHF患 者(NYrta I级，n=390)(196．1i105．3 finol／lunol Vs．177．4a：80．6 finol／pmol，t=2．815， P=0．005)，并且，尿液AQP2／uCr水平随NYHA心功能分级：I级(n-390)、II级 (n=168)、III级(n=1