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小鼠免疫组化小论文格式报告 　　小鼠组织切片免疫组化实验步骤材料：　　二甲苯　　酒精　　EDTA抗原修复工作液　　Tris-NaCl(TBS)　　DAB显色液。方法：　　1、石蜡切片置60℃烘箱中烘烤过夜。　　2、二甲苯中脱蜡，梯度酒精入水(无水乙醇，95％酒精)，浸泡于蒸馏水中待用。　　3、抗原修复　　取500mlEDTA抗原修复工作液于1000ml烧杯中，在小功率电炉上加热，至似沸微沸。将组织切片缓慢放入烧杯。继续加热，保持液体在微沸状态20分钟。将烧杯移开火源，室温下自然冷却后取出切片，蒸馏水洗1次3分钟，TBS洗2次每次3分钟。　　4、每张切片加一滴或50ul3％过氧化氢溶液，室温下孵育10min，以阻断内源性过氧化物酶的活性。TBS冲洗3次，每次3min。　　5、除去TBS液，加一滴或50ul一抗，阴性对照采用普通血清，室温下孵育2小时，或4℃过夜。　　6、TBS洗3次，每次5min，除去TBS液，每张切片加一滴或50ulpolymerenhancer，室温下孵育20min，TBS冲洗3次，每次3min。　　7、除去TBS液，每张切片加一滴或50ul过氧化物酶标记的抗鼠/兔聚合物，室温下孵育30min，TBS洗3次，每次3min。　　8、除去TBS液，每张切片加一滴或50ul新鲜配制的DAB，显色3－10min。　　9、自来水冲洗，苏木素复染10min，水冲洗。%的盐酸分化，自来水冲洗，TBS返蓝。　　10、不需脱水，直接用中性树脂封片。　　注意事项　　抗原修复时必须保证切片始终能浸泡在液体内，一定要等工作液冷却后才能将切片取出　　免疫组化，是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂显色来确定组织细胞内抗原，对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。　　详细　　实验方法　　?小鼠组织切片免疫组化实验步骤　　实验材料　　?小鼠　　试剂、试剂盒　　?　　?　　?　　?　　?　　?二甲苯无水乙醇95%乙醇EDTA抗原修复工作液TBSDAB显色液　　仪器、耗材　　石蜡　　?烘箱　　?电炉?　　材料　　二甲苯　　酒精　　EDTA抗原修复工作液　　Tris-NaCl(TBS)　　DAB显色液。方法　　1.石蜡切片置60℃烘箱中烘烤过夜　　2.二甲苯中脱蜡，梯度酒精入水(无水乙醇，95％酒精)，浸泡于蒸馏水中待用　　3.抗原修复　　取500mlEDTA抗原修复工作液于1000ml烧杯中，在小功率电炉上加热，至似沸微沸。将组织切片缓慢放入烧杯。继续加热，保持液体在微沸状态20分钟。将烧杯移开火源，室温下自然冷却后取出切片，蒸馏水洗1次3分钟，TBS洗2次每次3分钟。　　4.每张切片加一滴或50ul3％过氧化氢溶液，室温下孵育10min，以阻断内源性过氧化物酶的活性。TBS冲洗3次，每次3min。　　5.除去TBS液，加一滴或50ul一抗，阴性对照采用普通血清，室温下孵育2小时，或4℃过夜。　　6.TBS洗3次，每次5min，除去TBS液，每张切片加一滴或50ulpolymerenhancer，室温下孵育20min，TBS冲洗3次，每次3min。　　7.除去TBS液，每张切片加一滴或50ul过氧化物酶标记的抗鼠/兔聚合物，室温下孵育30min，TBS洗3次，每次3min。　　8.除去TBS液，每张切片加一滴或50ul新鲜配制的DAB，显色3－10min。　　9.自来水冲洗，苏木素复染10min，水冲洗。%的盐酸分化，自来水冲洗，TBS返蓝。　　10.不需脱水，直接用中性树脂封片。　　注意事项　　抗原修复时必须保证切片始终能浸泡在液体内，一定要等工作液冷却后才能将切片取出　　【摘要】:本文通过分析免疫组化技术的原理及科研价值,把它在小鼠组织中的具体应用,存在的具体问题和注意事项逐步剖析开来。旨在根据小鼠组织的特有情况进一步优化免疫组化的条件,针对性的解决小鼠在应用该技术时存在的局限性,使我们能得到更好的小鼠组织切片和实验数据。　　【关键词】:小鼠组织;免疫组化技术　　【中图分类号】【文献标识码】a【文章编号】1007-8517(XX)06-034-1　　医学研究和科研领域经常会应用动物模型来进行研究,以此来探索人类疾病的模拟反应。在过去一个世纪的研究中,小鼠已经成为建立人类疾病的动物模型的最佳实验材料。当科研人员应用小鼠做为研究对象时,往往采用免疫组织化学的方法对小鼠组织进行鉴定和分析。但是由于免疫组化操作的影响因素诸多,免疫组化效果不稳定等因素常