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现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2016, Vol.32, No.9 基于细胞组学技术提高胶球藻C-169中性脂 染色的有效性 魏东，李露 （华南理工大学食品科学与工程学院，广东广州 510640） 摘要：本研究基于流式细胞仪、荧光酶标仪、激光共聚焦扫描显微镜等细胞组学分析技术，系统研究了藻液细胞浓度、Nile Red 浓度、助溶剂种类和浓度，以及染色温度、染色时间、振荡时间等对检测藻细胞中性脂相对含量（以平均荧光强度表示）的影响，提 6 高了胶球藻C-169 中性脂染色的有效性。结果表明，Nile Red 荧光染色的最佳藻细胞浓度为 10 mL ，染料浓度在0.05~0.2 μg/mL 之间 较适宜且不会产生过量的荧光干扰；添加 15%~30% （V/V ）丙三醇能显著增强染料进入细胞的通透性；25~40 ℃范围内胶球藻染色后 的荧光强度较强但无显著差异（p 0.05 ）；染色时间超过 10 min 及振荡时间超过 30 s 均未显著提高胶球藻C-169 染色后的平均荧光强 度。系统优化后的染色方法可从细胞水平上显著提高中性脂荧光检测的精确性，同时为其他微藻采用这一荧光探针快速测定中性脂含 量提供了快速有效方法。 关键词：胶球藻 C-169；细胞组学；流式细胞术；Nile Red；中性脂 文章篇号：1673-9078(2016)9-20-27 DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2016.9.004 Improvement in the Effectiveness of Staining Neutral Lipids in Coccomyxa subellipsoidea C-169 by Cytomics Technologies WEI Dong ，LI Lu (School of Food Sciences and Technology, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China) Abstract: Using cytomics technologies, such as flow cytometry, fluorescence microplate reader, and confocal laser scanning microscope, the effects of algal cell concentration, nile red concentration, types and concentration of assistant solvents, staining temperature and time as well as shaking time on the relative content of neutral lipids in algal cells (expressed as average fluorescence intensity) were investigated. The effectiveness of staining neutral lipids in Coccomyxa subellipsoidea C-169 was improved. The results indicated that the opti