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实验八 化学因素对微生物的影响 一、目的要求 1．了解常用化学药品对微生物的作用。 2．学习测定石炭酸系数的方法。 二、基本原理 重金属离子可与菌体蛋白质结合使之变性或与某些蛋白的巯基结合而使酶失活，重金属盐则是蛋白质沉淀剂，或与代谢产物发生螯合作用而使其变为无效化合物； 有机溶剂可使蛋白质及核酸变性，也可以破坏细胞膜透性使内含物外溢； 碘可与蛋白质酪氨酸残基不可逆结合而使蛋白质失活，氯气与水发生反应产生的强氧化剂也有杀菌作用； 为了比较各种化学消毒剂的杀菌能力，常以石炭酸为标准，即将某一消毒剂作不同稀释后，在一定条件下，一定时间内致死全部供试微生物的最高稀释浓度，与达到同样效果的石炭酸的最高稀释度的比值，称为这种消毒剂对该种微生物的石炭酸系数（酚系数）。石炭酸系数越大，说明该消毒剂杀菌能力越强。 三、器材 1、菌种：大肠杆菌,金黄色葡萄球菌； 2、培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基,牛肉膏蛋白胨液体培养基. 3、溶液或试剂：2.5%碘酒、0.1%升汞、5%石炭酸、75%乙醇,100%乙醇,1%来苏尔,0.25%新洁尔灭,0.005%龙胆紫，0.05%龙胆紫，无菌水生理盐水。 4、仪器或其他用具：无菌培养皿，无菌滤纸片、试管、吸管、三角涂棒、涂布器、镊子、移液枪等。 四、操作步骤 1．滤纸片法测定化学消毒剂的杀菌作用 (1)将已灭菌并冷却至50℃左右的牛肉膏蛋