普通生物学实验讲义(物理)文档.docVIP

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普通生物学实验讲义 (2011年版) 绍兴文理学院生命科学学院 普通生物学课程组编 移液器的使用方法 按照下列步骤可以用移液器正确而准确地移取液体: 选择一支量程合适的移液器。大多数可调式移液器只能在特定量程范围内准确移取液体,不能移取低于说明书上最低的液体。一定不要试图移取超过最大量程的液体,否则会损坏移液器。 常用移液器有三种量程:100?l—1ml,10?l—100?l,0.5 ?l—10?l。 设置移液量。通过旋钮设置刻度:刻度一般由三-四个数字组成,从上往下读或从左往右读,用黑色的调节轮调节容积(图2-4)。这三个数字是容积的前三位数,由移液器的最大容积(标在推动按钮上面)决定。 将新的一次性枪头装在吸液杆上。二者要相匹配,并且安装正确。用力推动,并轻轻旋转枪头使之套紧,否则,移取的液体体积将少于设定的体积,溶液也会从枪头上往下滴。枪头通常装在盒子里,使用方便。如果需要无菌条件,则整个过程都要按无菌操作进行。 检验移液量。用移液器吸取一定体积的去离子水,放在天平上称重,假设1mg水体积为1ul (1mm3),测量误差应在1%的范围内。对于微量液体,可多次移取,如移取20次50ul的去离子水,质量应为100mg。如果移液器不准,吸液量显著多于或少于设定体积,可改用校准的移液器,或将移液刻度相应地调大或调小,进行校准(实际移液量比移液器的显示值更重要)。如果移液器不精确,每次移取的体积变化更大,就要进行维修,校准。 吸取一定体积的液体。手握移液器,按下推动按钮,直到遇到一个阻力(第一止点),观察所吸液体页面,将枪头垂直浸入液体中(注意不能过深以致液体沾到移液器),缓慢平稳地松开拇指,同时观察吸入液体有无气泡,停1S左右,待液体吸入后,取出移液器。枪头外壁不应附有液滴。 目测吸入枪头的液体体积是否合理。如100ul体积约占P20型枪头容积的一半。如果移液器保持竽握取, 枪头安装正确,则不应有液滴滴下。 释放液体。将枪头头部靠在器壁上,约成10o~20o倾角。慢慢按下推动按钮直到终点,完全排出液体,保持推动按钮至终点的状态取出移液器。 退下枪头。按下卸枪头按钮(有的移液器不带卸枪头器),退下枪头。如果枪头被污染了,可直接退到盛有消毒液功废液的容器里。如果不重复取液,更换新的枪头,重复上面的第(5)~(8)步。移液器必须卸掉枪头后才能放在移液器架上。 实验一 普通光学显微镜的构造、使用方法及观察 【实验目的】 1. 了解显微镜的构造和各部分的作用,掌握显微镜的使用技术和保养措施 2. 学会简易临时玻片的制作方法和生物绘图方法 【实验原理】 (一)显微镜的主要构造 普通光学显微镜的构造主要分为三部分:机械部分、照明部分和光学部分。 1.机械部分 (1)镜座:是显微镜的底座,用以支持整个镜体。 (2)镜柱:是镜座上面直立的部分,用以连接镜座和镜臂。 (3)镜臂:一端连于镜柱,一端连于镜筒,是取放显微镜时手握部位。 (4)镜筒:连在镜臂的前上方,镜筒上端装有目镜,下端装有物镜转换器。 (5)物镜转换器(旋转器):接于棱镜壳的下方,可自由转动,盘上有3-4个圆孔,是安装物镜部位,转动转换器,可以调换不同倍数的物镜,当听到碰叩声时,方可进行观察,此时物镜光轴恰好对准通光孔中心,光路接通。 (6)镜台(载物台):在镜筒下方,形状有方、圆两种,用以放置玻片标本,中央有一通光孔,我们所用的显微镜其镜台上装有玻片标本推进器(推片器),推进器左侧有弹簧夹,用以夹持玻片标本,镜台下有推进器调节轮,可使玻片标本作左右、前后方向的移动。 (7)调节器:是装在镜柱上的大小两种螺旋,调节时使镜台作上下方向的移动。 ①粗调节器(粗螺旋):大螺旋称粗调节器,移动时可使镜台作快速和较大辐度的升降,所以能迅速调节物镜和标本之间的距离使物象呈现于视野中,通常在使用低倍镜时,先用粗调节器迅速找到物象。 ②细调节器(细螺旋):小螺旋称细调节器,移动时可使镜台缓慢地升降,多在运用高倍镜时使用,从而得到更清晰的物象,并借以观察标本的不同层次和不同深度的结构。 2.照明部分 装在镜台下方,包括反光镜,集光器。 (1)反光镜:装在镜座上面,可向任意方向转动,它有平、凹两面,其作用是将光源光线反射到聚光器上,再经通光孔照明标本,凹面镜聚光作用强,适于光线较弱的时候使用,平面镜聚光作用弱,适于光线较强时使用。 (2)集光器(聚光器)位于镜台下方的集光器架上,由聚光镜和光圈组成,其作用是把光线集中到所要观察的标本上。 ①聚光镜:由一片或数片透镜组成,起汇聚光线的作用,加强对标本的照明,并使光线射入物镜内,镜柱旁有一调节螺旋,转动它可升降聚光器,以调节视野中光亮度的强弱。 ②光圈(虹彩光圈):在聚光镜下方,由十几张金属薄片组成,其外侧伸出一柄,推动它可调节其开孔的大小,以调节

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