实验二 植物细胞染色体组型分析.ppt

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实验二 植物细胞染色体组型分析 一、实验目的 1、了解染色体组型分析的原理及各项参数意义。 2、学习染色体组型分析的方法。 3、根据染色体的形态特征,绘制出染色体的模式图。 二、实验原理 各种动植物的细胞中都有一定数目的染色体。染色体组型分析又称核型分析,就是分析细胞中染色体的数目和形态结构特点,并用表格、图示将这些特点展示出来。 染色体的形态以有丝分裂中期最为显著,所以一般都分析该时期染色体。染色体的特征包括染色体数目、大小、着丝粒位置、次缢痕的有无及位置、随体的有无及形态和大小、B染色体的有无及数目等。近年来发展的染色体显带技术、原位杂交技术,又为染色体增添了新的更精确的鉴别特征。 染色体组型分析是细胞遗传学、现代分类学和进化理论的重要研究手段。 (1)染色体组型分析反映了物种染色体水平的整体特征,研究和比较物种的染色体组型可以确定物种本身的遗传学特征,有助于对物种的亲缘关系进行判断和分析,揭示遗传进化的过程和机制。 (2)染色体组型分析也是分析生物染色体数目和结构变异的基本手段,在染色体识别与鉴定中也起着重要作用。 三、仪器与材料 材料:植物细胞染色体的照片或永久片(可由实验一所得),本实验是玉米根尖染色体照片。 器具:显微镜、测微尺、毫米尺、镊子、剪刀、绘图纸、圆规、铅笔等。 四、实验说明 染色体组型分析通常包括如下指标: 1、染色体的数目:一般以体细胞染色体数目为准,至少统计5-10个个体、30个以上细胞的染色体数目为宜,在个体内出现不同数目时,则应如实记录其变异幅度和各种数目的细胞数或百分比,而以众数大于85%者为该种类的染色体数目。 2、染色体绝对长度:以微米(μm)表示,可在显微镜下通过侧微尺测量,也可在放大的照片上进行(后者更常用),然后按下面公式计算: 绝对长度值仅在某些情况下有价值,因为在染色体制片中,预处理时间、染色体凝缩程度、制片操作等都会影响绝对长度,所以,绝对长度往往不稳定,而相对长度则是稳定的可比较数值。 3、相对长度:均以百分数表示,即: 精确到0.01 4、染色体长度比:这是指核型中最长染色体与最短染色体的比值,即: 这一数值在核型分析中是衡量核型不对称程度的主要指标之一。 5、臂比值:指长臂与短臂的长度比值,即: 精确到0.01 6、着丝粒位置:根据臂比值可将染色体分成以下几种类型: 7、次缢痕及随体 次缢痕的有无及位置,随体的有无、形态和大小都是重要的形态指标,也应仔细观察记载。带随体的染色体用SAT标记。 四、实验程序 1、将打印好的图片上的每条染色体进行随机编号。 2、测量每一条染色体的长臂、短臂长度(mm ,精确到0.01 ),自行制表。随体长度不计入染色体长度,但需标注带随体染色体的编号。 3、计算每一条染色体相对长度及臂比值。 4、根据测量数据,即染色体相对长度、臂比值、次缢痕的有无及位置、随体的形状和大小等进行同源染色体配对。 5、根据图片编号及同源染色体配对情况,剪下染色体,按从长到短的顺序排列染色体,一对一对地短臂向上、长臂向下,各染色体的着丝粒排在一条直线上,贴成一完整的染色体组型图,再绘制出核型模式图。性染色体或B染色体一律排在最后。 此外,一些高等植物异源多倍体,如小麦染色体组AABBDD,可先根据系统发育的来源进行分组,然后各组按大小进行排列。 [重要实验步骤]: 在测量染色体长度的时候,一定要仔细,如果染色体形态是直线,应用直尺测量;如果染色体形态不规则,应用棉线按照染色体的形态进行测量。 [实验注意事项] : 染色体对从大到小,短臂向上、长臂向下,各染色体的着丝粒排在一条直线上。 例如 1、根据所测得结果填写下表,计算吊兰染色体组总长度。 2、经测量分析,可将宽叶吊兰根尖的染色体进行配对。 3、绘制吊兰核型模式图 4、根据吊兰的染色体参数、核型及核型模式图分别见上表、配对图和模式图。吊兰的14对染色体中,各种类型的染色体分别有多少对,写出核型公式是 K(2n)=2x=28=?M + ?m + ?sm + ?st + ?t + ?T。 本例核型公式K(2n)=2x=28=2m+24sm+2st。 2m+22sm+2sm(SAT)+2st [作业] : 1、绘出玉米染色体核型图及模式图。 2、进行组型分析的依据是什么? * 着丝粒 次缢痕 随体 相对长度= 染色体长度比= 臂比值= T 端部着丝粒(terminal point) ∞ t 端部着丝粒区(terminal region) 7.00以上 st 亚端部着丝粒区(sub

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