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急性毒性试验报告
毒理学实验二经口急性毒性试验 一、实验目的 1、掌握实验动物分组方法 2、测定LD50的试验设计原则 3、小鼠的经口灌胃技术 二、试剂和材料 1、实验动物: 动物品种:健康成年ICR小鼠,体重18g~22g 样品 2、器材:注射器、灌胃针头、烧杯、吸管、容量瓶、烧杯、棉签、动物秤。 3、试剂:敌敌畏、苦味酸染液。 三、实验内容 1、健康实验动物的选择和性别鉴定 选择健康的雄性小鼠 肛门与生殖孔距离:大者为雄性,小者为雌性 2、实验动物称重、编号和随机分组 选择体重在18-22g的小鼠,采用随机分组的方法,每组10只小鼠,用黄色的苦味酸饱和液标号1~9,10号小鼠不标记。 3、受试化学物溶液的配制 确定灌胃量:/10g 确定最高给药量,计算溶液浓度,估计给药总体积 药品称量及稀释 4、小鼠灌胃技术 左手固定,右手持灌胃器,插入动物口腔,沿咽后壁徐徐插入食道,深度为口腔至剑突的距离。 5、毒性体征的观察和LD50计算 毒性体征的观察: 染毒后注意观察小鼠中毒的发生、发展过程及死亡数和死亡时间 按表格记录动物体征及出现时间,记录死亡情况及时间,观察期为30min LD50的计算: a、实验各组剂量的确定:设5组,每组雌雄动物各10只。 剂量组距d为: d?lgLD100?lgLD0组数?1 d为相邻两个剂量组剂量对数之差 利用lgLD0依次加d,取反对数,即可得出各组剂量。 b、LD50的计算: 1lgLD50?Xk?d?(Pi?Pi?1)2Xk:最大剂量的对数d:相邻两组对数剂量之差数Pi:各组死亡率i:组数 C、求半数致死量的95%可信区间 标准误公式: Pi(1?Pi)SlgLD50?d?ni?1ni:实验动物数。 95%可信区间:lg-1(lgLD50?) 四、实验过程 1、人员分工:本次实习同学分两个大组(A组和B组),分别在不同实验室。每大组分5个小组,分别处理雌雄动物,每小组10只动物。 集体活动:1、2、3、4、5组各1人,进行受试物配制。 各小组活动: 每小组1人,进行动物标记。 每小组1人,进行体重记录。 每小组1人,进行灌胃。 每小组1人,根据体重吸取受试物 五、剂量设计及受试物配制表 见附件 六、实验结果 1、急性经口毒性试验原始记录 2、LD50计算表 3、结果计算 lgLD100?lgLD0d?=(lg500-lg100)÷4=÷4=组数?1 Pi(1?Pi)?d?=×=ni?1 1lgLD50?Xk?d?(Pi?Pi?1) 2=/2×++ +) =20-1 95%可信区间:lg-1(lgLD50?) 95%可信区间:lg-1(?×) 即:~/Kg 七、实验结论与分析 1、毒性物质敌敌畏为中等毒性,体重在18~22g之间的雄性健康成年ICR小鼠经口急性染毒的LD50为~/Kg。 2、毒性特征:小鼠在经口染毒后短时间内出现抽搐,躁动不安,麻痹,肌张力松弛,反应减弱,同时伴有呼吸加快,口吐白沫,鼻孔溢液,尿失禁,腹泻等症状,然后在10分钟左右死亡。 3、本组小鼠为径口染毒的最低剂量,没有出现死亡小鼠,观察过程中,6号小鼠出现亢奋,8号小鼠出现腹泻症状。 4、经过上述症状,可以看出敌敌畏急性毒性包括中枢神经系统与躯体感觉和运动系统毒性,呼吸系统毒性,消化系统毒性,泌尿毒性。 d?lgLD100?lgLD0 组数?1 急性毒性试验(来源于生物谷)佚名 试验目的:急性毒性试验是在24小时内给药1次或2次,观察动物接受过量的受试药物所产生的急性中毒反应,为多次反复给药的毒性试验设计剂量、分析毒性作用的主要靶器官、分析人体过量时可能出现的毒性反应、I期临床的剂量选择和观察指标的设计提供参考信息等。 一、啮齿类动物单次给药的毒性试验 试验条件 1.动物品系:常用健康的小鼠、大鼠。选用其他动物应说明原因。年龄一般为7-9周龄。同批试验中,小鼠或大鼠的初始体重不应超过或低于所用动物平均体重的20%。实验前至少驯养观察1周,记录动物的行为活动、饮食、体重及精神状况。 2.饲养管理:动物饲料应符合动物的营养标准。若用自己配制的饲料,应提供配方及营养成分含量的检测报告;若是购买的饲料,应注明生产单位。应写明动物饲养室内环境因素的控制情况。 3.受试药物:应注明受试药物的名称、批号、来源、纯度、保存条件及配制方法。 试验方法: 由于受试药物的化学结构、活性成分的含量、药理、毒理学特点各异,毒性也不同,有的
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