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强心苷实验实验报告 　　复旦大学　　功能学实验实验报告　　姓名刘忠和学号上海医学院临床医学院13级临床医学八年制二班实验日期XX年11月22日交报告日期XX年11月29日指导老师汪慧菁【实验名称】药物对哇巴因诱发豚鼠心律失常的保护作用【实验目的】学习用哇巴因诱发豚鼠心律失常的方法，观察利多卡因对于此种心律失常的保护作用　　【实验动物】豚鼠一只，体重【实验过程】　　1.药品与器材　　药品：20%乌拉坦、%哇巴因，%利多卡因、生理盐水；　　器材：哺乳动物手术器械、蠕动泵、头皮针、注射器、SMUP-U生物信号处理系统。2.实验步骤1)取豚鼠一只，麻醉、固定；　　2)暴露一侧颈外静脉，向心插入与三通相连的头皮针，用NS试针后，用动脉夹　　固定，接心电图电极3)注射药物　　甲组：%利多卡因5mg/kg，/100g乙组：生理盐水，/100g4)3min后，开启蠕动泵，流速/min，记录出现室性心律失常出现的时间，　　以及哇巴因的剂量。　　【实验记录】　　图1豚鼠正常心电图　　图一中可见豚鼠正常心电图，有窦性P波，QRS波及T波。波形正常，心律齐，作为正常对照。于标记时开始注射哇巴因，作为计时起点。　　图2豚鼠出现室速心电图　　图二中，豚鼠相关窦性P波消失，QRS波宽大畸形，出现室性心动过速。　　图3豚鼠出现室颤心电图　　图三中，豚鼠心电图出现不均匀的低小波，略有室颤表现，但不甚明显。此时时间为2分12秒，共注入哇巴因。　　图4豚鼠死亡心电图　　图四中，豚鼠心电图低平，心脏停止搏动，死亡。此时时间为3分06秒，共注入哇巴因。　　表1不同药物对哇巴因诱发豚鼠心律失常的作用　　【实验讨论】　　哇巴因，即毒毛花苷G，属强心苷类药物，为一种作用较弱的钠泵抑制剂。心肌细胞膜上的Na+-K+-ATP酶为强心苷类药物的特异性受体。强心苷类药物与其　　+++　　特异性结合后可抑制Na-K-ATP酶活性，导致Na泵失灵，使细胞内Na+增加，K+减少。增多的Na+通过Na+-Ca2+双向交换机制使Na+内流减少，外流增加，而Ca2+则按照相反方向流动。高浓度时，强心苷可过度抑制Na+-K+-ATP酶活性，使细胞失K+，最大舒张电位减小，自律性提高，K+外流减少使ERP缩短，细胞内Ca2+增加可引起Ca2+振荡、早后除极、迟后除极等；中毒剂量下也可增强中枢交感作用。在心电图行表现为，PP间期、PR间期延长，ST段压低、T波地平或倒置。故强心苷中毒可引起室性早搏、室性心动过速、室颤等心律失常症状。　　利多卡因可轻度阻滞钠通道，主要作用于浦肯野纤维和心室肌细胞。通过抑++　　制Na内流，促进K外流，轻度降低动作电位4期除极速率，提高兴奋阈值，降低自律性；抑制参与动作电位2期复极化的少量钠内流，缩短或不影响浦肯野纤维和心室肌的动作电位过程，对正常心肌组织的电生理特性影响较小，因此可用于治疗强心苷中毒引起的室性心动过速和室颤。　　【实验结论】利多卡因可对哇巴因诱发豚鼠心律失常起到保护作用　　天然药物化学实验考察：　　1．水提取液　　加水60ml，50-60℃　　滤渣　　取　　**号药粉抽滤　　水浴加热1小时做下列试验2．乙醇提取液：　　60ml回流抽滤10ml作甲项试验取**号粗粉10g95%乙醇1小时浓缩液　　15ml酸液作乙项试验　　2%HCl用10ml乙酸乙酯溶解　　加5%NaOHNaOH层　　洗涤两次水洗至中性　　2~3ml/每次乙酸乙酯液　　水浴蒸干　　以15ml乙醇溶解作丙项试验　　甲项试验　　加10ml石油醚　　过滤，　　取**号粗粉1g　　2-3小时，　　强心苷的提取与分离　　提取　　分离　　色谱鉴定　　纸色谱　　薄层色谱　　强心苷的分离提纯通常比较复杂与困难，因为它在植物中的含量一般都比较低，而且同一中药中所含的强心苷类成分不仅种类多、结构性质相近，还易受植物体内酶、酸的影响生成相应的次生苷，从而增加了成分的复杂性，同时共存的糖类、鞣质、皂苷、色素等，往往能影响或改变强心苷的溶解性，这些都增加了提取分离工作的难度。　　提取时还需考虑强心苷在植物体中的存在形式。如需提取原生苷，要注意抑制酶的活性，防止酶水解的发生。措施诸如原料采收后要低温通风快速干燥、保存期间注意防潮、用乙醇提取以破坏酶的活性。同时还要注意在提取过程中避免酸或碱的影响。如需提取次生苷，则要利用酶的活性，如采用发酵法进行酶解等。　　提取　　提取强心苷通常用70%～80%的乙醇为溶剂，若原料为种子类药材或含脂类杂质较多时，需先用石油醚或汽油脱脂处理后再提取；若原料为叶或全草，含叶绿素较多时，可用析胶法，将醇提液浓缩后静置，使叶绿素等脂溶性杂质成胶状沉淀析出，滤过除去，也可用活