PCR仪操作指南.doc

PCR仪操作指南 步骤： 开机：打开开关，视窗上显示“SELF TEST”,显示10秒中后，显示RUN-ENTER菜单:准备执行程序。 放入样本管，关紧盖子。 一、如果要运行已经编好的程序，则直接按《Proceed》，用箭头键选择已储存的程序，按《Proceed》，则屏幕显示:按《Proceed》选择ENABLE，则开始执行程序。 如果要输入新的程序，则在RUN-ENTER菜单上用箭头键选择ENTER PROGRAM,按《Proceed》，屏幕显示 按《Proceed》，1）选择NEW,命名新的程序，最多8个字母，输入后按《Proceed》确认(如何输入字母、数字)。 2）输入程序步骤：名字输入后，显示 按《Proceed》则可以输入温度（0～100℃），按《Proceed》确认后，则可以输入孵育时间，用《Select》键移动光标，输入数字，完成后按《Proceed》确认，跳到下一步，输入方式同上。 选择GOTO，输入循环步骤时链接到第几步（循环数最多可达9999次）(为实际循环数－1)。 选择option,显示 再选择increment,按《Proceed》确认，输入初始的温度，确认后输入时间，按《Proceed》确认，然后输入每个循环增加或减少的温度，增加用正值，减少用负值（－0.1℃～6℃），按《Proceed》确认。 选择extend, 按《Proceed》确认,输入每个循环增加或减少的时间（－60～60秒），按《Proceed》确认。 选择slop（指温度上升或下降的速率）,输入温度的改变值（－0.1～1.5℃）按《Proceed》确认，然后输入加热或致冷的速度，按《Proceed》确认。 选择End,输入结束步骤。 输入完成的程序后，到RUN-ENTER菜单，选择新程序，开始运行。 其它：用《pause》可以暂停一个运行的程序，再按一次继续程序。 用《stop》或《Cancel》可停止运行的程序。 编辑程序： 可以用《Cancel》键删除输错的值，输入新的值后按《Proceed》确认。 对于未输完的程序，要先输入END，按《Proceed》将程序储存后才能删除。 删除已经储存的程序：从RUN-ENTER菜单中选择RUN－PROGRAM，按《Proceed》，显示主菜单，选择DELET,用《Select》选择删除。 查看程序的步骤：在主菜单上选择LIST，按《Proceed》，用《Select》将选择名称，再按《Proceed》，显示程序的第一步，用《Select》键向前、向后翻页查看，此时不能改变程序的值。 编辑已有的程序： 从RUN-ENTER菜单中选择RUN－PROGRAM，按《Proceed》，显示主菜单，选择EDIT，按《Proceed》确认，用《Select》键选择要编辑的程序，按《Proceed》显示程序的第一步。 2、用《Select》键将光标移到要改变的温度或循环的值上，键入新值，按《Proceed》确认，按《Cancel》 删除键入的值，出现空格，键入新值后确认。 注：一旦值被改变或删除，原来的值不能恢复，必须重新键入。 编辑时间值：必须重新键入小时、分钟、秒，按《Proceed》。 如何设置一个PCR体系： 一般分为8步： 预变性：可用94～95℃，2～10min,一般用5min。 变性：一般用94℃，30s~2min,一般45s~1min。 退火：温度自定，30s~2min。 延伸：70～75℃，一般72℃，对于〈2kb,1min;2kb,每增加1kb加1min。 循环数：一般25～35个循环。 最终延伸：72℃，5～15min。 保存：10℃，时间设为0。 END 半定量RT-PCR电泳图如何分析 电泳仪操作方法 操作步骤： 接通电源前，首先检查电源开关是否处在“关”位置，预置–工 作键应处于预置状态。 2. 将仪器与负载之间的连线可靠连接，注意极性。 打开电源开关，此时，电源指示灯亮，数字表、时钟电路均应有 数字显示。 根据需要选择3000V或1500V档，并将相应键按进。 按下V选择键，此时数字表显示值为电压预置值。根据实验要求， 旋转电压调节旋钮，使显示值与所要求值一致，则电压预置完成，对于电流和功率预置依此类推。但工作过程中，要注意负载大小，使符合欧姆定律。 校时钟将时钟显示分别用“快进”或“慢进”键调到当时时间， 再按下“定时”键，此时显示的为定时时间，按住“定时”键，通过调节“快进”或“慢进”，可调整定时到所需时间，定时时间到后，蜂鸣器报警，按一下止闹键，报警声停止。当需要定时关