流式免疫分型检测报告.docxVIP

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流式免疫分型检测报告   1   2   3   4   洗涤两次。   (6)加入1%多聚甲醛重悬细胞;固定待测。   (7)流式细胞仪检测荧光值,每管计数10,个细胞。   C.细胞周期、细胞凋亡及DNA倍体分析样品的制备:   (1)待测样本制成单细胞悬液,然后200g离心5分钟,弃上清。   (2)用4℃预冷的70%冷乙醇固定,4℃保存,至少固定18小时。   (3)调整细胞浓度为106细胞/毫升,取1毫升细胞悬液,用PBS洗三次,细胞重悬于1毫升PI染液中,37℃孵育30分钟即可进行流式分析。   (4)PI染液终浓度为50微克/毫升,RNaseA终浓度为20微克/毫升。   实验具体收费、标本的收集、实验试剂的定购等事宜,请联系嘉美生物。   实验预约热线:400-698---   实验预约邮箱:jiamei_bj@@   中国生命科学实验技术服务、定制高端平台——嘉美生物实验技术中心   嘉美生物是一家主要从事AnnexinV,信号转导抗体,重组人和动物蛋白,磷酸化抗体,各种动物ELISA试剂盒,生物实验服务等研发与销售的高科技生物公司。   相关文章   ?   ?   ?   ?   ?   ?   ?   ?芯片类检测:Luminex\PLEXMAP\BIOPLEX液相芯片检测实验服务细胞生物学实验:流式分选外包服务分子生物学外包服务:个性化治疗分子检测外包服务热点实验服务:国家自然科学基金等基金的申请外包服务热点实验服务:大陆核心期刊三包服务原代细胞培养服务:原代细胞分离培养鉴定以及检测等整体课题服务   流式细胞仪在白血病免疫分型诊断   一、概述   近年来白血病的免疫分型已成为诊断血液恶性肿瘤不可缺少的重要标准之一。早年曾用过的荧光显微镜或APAAP方法基本被废弃。国际上公认的通用的方法是流式细胞术。流式细胞术白血病免疫分型是利用荧光素标记的单克隆抗体作分子探针,多参数分析白血病细胞的细胞膜和细胞浆或细胞核的免疫表型,由此了解被测白血病细胞所属细胞系列及其分化程度。   1.流式细胞仪诊断白血病的依据   ⑴FCM能快速,多参数,客观的定性又定量测定细胞膜、浆、核的抗原表达   ⑵至今尚未发现白血病的特异抗原。   ⑶能用正常血细胞的单抗来进行免疫分型是基于白血病形成的分化阻断学说。即白血病细胞基因异常,分化受阻于某阶段形成不同亚型的白血病。这群细胞充盈于骨髓。正常血细胞从多能干细胞分化、发育、成熟为功能细胞的过程中,细胞膜、细胞浆或胞核抗原的出现、表达增多与减少甚至消失与血细胞的分化发育阶段密切相关,而且表现出与细胞系列及其分化程度相关的特异性。因此,这些抗原的表达与否可作为鉴别和分类血细胞的基础。白血病是造血系统的恶性肿瘤,在形态上变化虽相当大,但仍能表达正常血细胞所具有的抗原,因而仍可依据其抗原的表达谱对白血病进行免疫分型。   2.流式细胞仪诊断白血病的意义   ⑴骨髓血细胞是形态学分型的基础,FCM白血病免疫分型是对形态学分型的重要补充和进一步深化,国际白血病MIC分型协作组认为免疫分型对每一例急性白血病都是必不可少的,对下列情况意义更大:①用形态学、细胞化学染色不能肯定细胞来源的白血病。②形态学为急性淋巴细胞白血病或急性未分化白血病但缺乏特异性淋巴细胞系列抗原标记。③混合性白血病。④部分髓系白血病。目前,免疫分型对粒细胞和单核细胞白血病的鉴别尚有一定困难。⑤慢性淋巴细胞白血病。⑥微小残留白血病。⑵临床预测;可根据抗原的表达情况预测病情的预后:如白血病患者有CD7+与CD34+共表达,预后不好。   ⑶疾病监测:可监测病程的发展,疗效,可进行微小残留白血病的检测。   二、免疫分型常用的免疫标志及其意义   1.白血病系列分化抗原   T淋巴细胞白血病:CD3、CD5、CD7。   B淋巴细胞白血病:CD10、CD19、CD22。   NK淋巴细胞白血病:CD16、CD56、CD57。   髓系白血病:CD13、CD14、CD33、MPO。   红白血病:GlyA。   巨核细胞白血病:CD41、CD42、CD61。   2.白血病系列非特异性抗原   CD34、HLA-DR为早期细胞抗原,无系列特异性,可与CD38联合运用于免疫分型。一般而言,干/祖细胞CD34+、HLA-DR+、CD38-,原始细胞CD34+、HLA-DR+、CD38+,而幼稚细胞CD34-、HLA-DR-、CD38+。   3.白血病分化阶段抗原   T细胞抗原CD4、CD8。   B细胞抗原:CD10、Cyμ、SmIg、CD38和CyIg、CD11C。   4.白细胞共同(转载于:写论文网:流式免疫分型检测报告)抗原   CD45为白细胞共同抗原,其表达量在淋巴细胞最高,单核细胞,成熟粒细胞,早期造血细胞依次减

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