基于实时荧光定量PCR技术对不同盐碱程度土壤甲烷-生态环境学报.PDFVIP

生态环境学报 2015, 24(5): 797-803 Ecology and Environmental Sciences E-mail: editor@ 基于实时荧光定量 PCR 技术对不同盐碱程度 土壤甲烷氧化菌比活性的研究 * 杨铭德，焦燕 ，李新，温慧洋 内蒙古师范大学化学与环境科学学院，内蒙古 呼和浩特 010022 摘要：为了探究不同盐碱程度土壤甲烷氧化菌比活性与甲烷吸收速率的关系，通过室内 CH4 培养实验，采用实时荧光定量 PCR 技术，研究 3 种不同盐碱程度土壤，即：轻度盐化土壤（SA ）、强度盐化土壤（SB ）、盐土（SC ）CH4 吸收速率和甲 烷氧化菌比活性。以含有甲烷氧化菌功能基因pmoA 片段的重组质粒为标准品，测得标准曲线的相关系数r2 为 0.9977 ，扩 增效率为 86% ，溶解曲线峰值均一。结果表明：轻度盐化土壤（SA ）、强度盐化土壤（SB ）、盐土（SC ）CH4 吸收速率分 -1·h-1 ，表现为轻度盐化土壤（S ）强度盐化土壤（S ）盐土（S ）。土壤CH 吸收速率与土 别为28.4 、20.6、17.7 ng·kg A B C 4 壤甲烷氧化菌比活性显著正相关，Person 相关系数r=0.788 （P=0.012 ，n=9 ）。由Monte Carlo 法检验后表明：pH 、土壤浸 提液电导率 EC 与土壤甲烷氧化菌比活性显著负相关，相关系数分别为−0.943 （P=0.000 1 ，n=9 ）和−0.895 （P=0.001 ， n=9 ），而容重ρb 、总磷TP、总氮TN、有机碳OC 与土壤甲烷氧化菌比活性无显著相关性（P0.05 ）。较高pH 和EC 的 盐碱土壤，土壤甲烷氧化菌比活性低，CH4 吸收速率低。 关键词：盐碱土壤；PCR ；甲烷氧化菌；吸收速率；比活性 DOI: 10.16258/ki.1674-5906.2015.05.012 中图分类号：X171.3 ；S154 文献标志码：A 文章编号：1674-5906 （2015 ）05-0797-07 引用格式 ：杨铭德，焦燕，李新，温慧洋. 基于实时荧光定量 PCR 技术对不同盐碱程度土壤甲烷氧化菌比活性的研究[J]. 生态环境学报, 2015, 24(5): 797-803. YANG Mingde, JIAO Yan, LI Xin, WEN Huiyang. Specific Activity of Methanotrophs in Saline-Alkaline Soils Retrieved from A Fluorescent Quantitative Real-time PCR Technique [J]. Ecology and Environmental Sciences, 2015, 24(5): 797-803. CH4 是重要的温室气体，每年大约有 470 Tg 分描述微生物的多样性，可能会错失 99% 以上的 CH4 在大气中被吸收，其导致气候变暖的效能是等 微生物种类。因此，选用实时荧光定量 PCR 快速 量 CO2 的 20~30 倍（Cicerone 和 Oremland ， 检测甲烷氧化菌的新方法，具有灵敏度高、特异性 1988 ）。好气性的旱地土壤是目前唯一已知的由生 强、自动化程度高等特点。仝川和佘晨兴（2011 ） 物氧化 CH4 的汇，消耗全球大气 CH4 的 10% （张 利用 PCR-DGGE 技术分析了自然湿地微生物群落 玉铭等，2011 ）。甲烷氧化菌在大气中CH4 的氧