阻断Kv13通道可增强RAW2647巨噬细胞的吞噬功能.pdfVIP

中国科学: 生命科学 2015 年 第45 卷 第9 期: 871 ~ 880 《中国科学 》杂志社 SCIENTIA SINICA Vitae SCIENCE CHINA PRESS 论 文 阻断Kv1.3 通道可增强RAW264.7 巨噬细胞的 吞噬功能 ① ② ① ① ①* 祝红 , 闫莉 , 谷婧丽 , 郝维 , 曹济民 ① 中国医学科学院基础医学研究所, 北京协和医学院基础学院, 生理学系, 北京 100005; ② 中国医学科学院基础医学研究所, 北京协和医学院基础学院, 病理生理学系, 北京 100005 * 联系人, E-mail: caojimin@126.com 收稿日期: 2015-04-30; 接受日期: 2015-06-13; 网络版发表日期: 2015-09-08 国家重大科学研究计划(批准号: 2011CB93350)和国家自然科学基金(批准号: 基金资助项目 摘要 本研究旨在阐明电压门控性钾通道 1.3(Kv1.3)在巨噬细胞吞噬功能中的作用. 关键词 利用 RAW264.7 巨噬细胞吞噬鸡红细胞的半定量检测系统及吞噬异硫氰酸荧光素标记 Kv1.3 通道 吞噬 的大肠杆菌(E. coli) k-12 的流式细胞术定量检测系统测定巨噬细胞的吞噬功能. 研究发 巨噬细胞激活综合征 现, 用海葵神经毒素(ShK)(100 pmol/L)选择性阻断Kv1.3 通道能显著增强处于静息状态 免疫调节 的和被脂多糖(LPS)激活的RAW264.7 巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力; ShK 也可增强静 息RAW264.7 细胞吞噬大肠杆菌的能力, 但由于LPS 刺激吞噬的效应近乎饱和, ShK 并 不能进一步增加被LPS 激活的RAW264.7 细胞吞噬大肠杆菌的数量. ShK 促进LPS 激 活的RAW264.7 细胞释放一氧化氮(NO), 但并不增加静息RAW264.7 细胞的NO 释放. ShK(100 pmol/L) 自身并不影响静息RAW264.7 细胞释放细胞因子, 但能抑制LPS 激活 的RAW264.7 细胞释放白细胞介素-1. ShK(100 pmol/L)对RAW264.7 细胞的活力无明 显影响. RAW264.7 细胞表达Kv1.3 通道蛋白; LPS 使RAW264.7 细胞的Kv1.3 蛋白表达 下调, 菲律宾菌素Ⅲ(小凹蛋白依赖性内吞途径抑制剂)使 Kv1.3 蛋白表达上调, 细胞松 弛素D 对Kv1.3 蛋白表达无明显影响. 研究表明, RAW264.7 细胞表达Kv1.3 蛋白; 阻 断Kv1.3 通道可增强RAW264.7 细胞的吞噬能力和NO 生成. 结果提示, Kv1.3 通道可 能是 RAW264.7 细胞吞噬活动的负调节因子, 有可能成为治疗巨噬细胞吞噬功能异常 相关疾病的一个靶点. 可兴奋细胞和非可兴奋细胞均有丰富的离子通 号转导中起到了关键的作用. 目前已在T 淋巴细胞中 道表达. 但与可兴奋细胞的通道研究相比, 对非可兴 发现了5 种离子通道, 即电压门控钾通道1.3(Kv1.3)、 奋细胞(包括免疫细胞)离子通道功能的认识仍有待 钙激活钾通道 3.1(KCa3.1) 、Ca2+释放激活的钙通道 深入. 在免疫细胞中, 离子通道的活动在免疫活动信 (Ca2+ release-activated Ca2+ (CRAC)