黄荆子有效提取物及其活性成分对人卵巢癌CoC1细胞和移植瘤生长的影响-肿瘤学专业毕业论文.docxVIP

目 录 中文摘要1 英文摘要3 论文正文5 前 言5 实验设计7 实验材料11 实验方法13 实验结果17 讨 论 29 结 论 33 参考文献34 综 述38 成果目录46 致 谢47 南华大学硕士学位论文黄荆子有效提取物和活性成分筛选及抗人卵巢癌 南华大学硕士学位论文 黄荆子有效提取物和活性成分筛选及抗人卵巢癌 CoC1 细胞作用的实验研究 PAGE PAGE 1 黄荆子有效提取物及其活性成分对人卵巢癌 CoC1 细 胞和移植瘤生长的影响 研 究 生： 邓宇傲 导 师： 谢宛玉 教授 中文摘要 目的: 从 4 种黄荆子提取物中筛选抑制人卵巢癌 CoC1 细胞增殖活性最强的 提取物；评价黄荆子有效提取物及从中分级分离获得的 4 种木脂类化合物体外抑 制人卵巢癌 CoC1 细胞的生长作用和在体治疗卵巢癌的有效性，初步探讨其体内 抗肿瘤的作用机制。 方法：体外培养人卵巢癌 CoC1 细胞， MTT 比色法测定 EVn-10、EVn-20、 EVn-30、EVn-50 对人卵巢癌 CoC1 细胞活性的影响，筛选出效价最高的黄荆子 提取物；细胞计数法检测黄荆子有效提取物 EVn-50 及从中分级分离获得的 4 种 黄荆子木脂类化合物 Comp 6、Comp 7、Comp 8、Comp 10 对人卵巢癌 CoC1 细 胞生长的影响；人卵巢癌 CoC1 裸鼠移植瘤模型治疗实验评价 EVn-50、Comp 6、 Comp 7、Comp 8、Comp 10 体内治疗卵巢癌的有效性；SP 免疫组化法检测皮下 移植瘤中血管内皮生长因子、增殖细胞核抗原、血小板内皮细胞粘附分子蛋白的 表达。 结果： MTT 比色法结果显示 4 种黄荆子提取物对人卵巢癌 CoC1 细胞增殖活 性均有抑制作用，以 EVn-50 效价最高，其 TC50 为 1.02 μg/mL；细胞计数结果表 明：EVn-50、 Comp 6、Comp 7、Comp 8、Comp 10 对人卵巢癌 CoC1 细胞生长 具有抑制作用，且呈浓度及时间依赖性，其中，以 Comp 8 效价最高，其 TC50 为 1.40μg/mL；其次为 EVn-50，其 TC50 为 1.56 μg/mL； 体内实验显示以 5mg/kg 给 药 20 天时，EVn-50、Comp 6 对人卵巢癌 CoC1 细胞裸鼠皮下移植瘤生长抑制率 分别为 57.1%、55.7%；瘤重抑制率分别是 61.6%、51.5%，Comp 8 无效； EVn-50 和 Comp 6 能有效下调人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤中 VEGF、PCNA、CD31 蛋白表 达。 结论: 1. 黄荆子乙酸乙酯提取物 EVn-50 抑制人卵巢癌 CoC1 细胞增殖和生长； 2. 黄荆子木脂类化合物具有抑制人卵巢癌 CoC1 细胞生长作用； 3. 黄荆子乙酸乙酯提取物和黄荆子木脂类化合物（Comp 6）能有效抑制人卵巢 癌 CoC1 细胞裸鼠皮下移植瘤生长，其作用机制可能与抑制肿瘤细胞增殖、 肿瘤新血管形成有关。 关键词：卵巢癌 黄荆子 黄荆子乙酸乙酯提取物 治疗作用 Effects of the effective extract and active component from Vitex negundo seed on the growth of human ovarian cancer CoC1 cell line and xenograft in nude mice Abstract Objective: To investigate the therapeutic effect of four species of extracts and active components from Vitex negundo seed on human ovarian cancer CoC1 cell line. Methods:The viability of CoC1 cells was determinated by MTT assay; The trypan blue exclusion method was used to investigate the growth inhibitory effect of EVn-50 and four species of Lignans of Vitex negundo seed in CoC1 cells.The established tumor xenograft in nude mouse model was used to evaluate therapeutic effect of EVn-50 and four species of Lignans on h