对里氏木霉RutC-30所产非淀粉多糖酶系的分析-中国工业微生物菌种.PDF

维普资讯 篓 鱼 塑生 丝 对里 氏木霉 RutC．30所产非淀粉多糖酶系的分析 程 池 乐易林 熊 涛 姚 粟 曾哲灵 1(中国食品发酵工业研究院，北京 ，100027) 2(南 昌大学生命科学学院，南昌，330047) 摘 要 通过里 氏木霉 RutC-30以稻草和麸皮为基质进行 固态发酵 ，对其产生 的非淀粉 多糖酶 (NSP酶)进行分析 ，试验表 明里 氏木霉 RutC一30产生 的NSP酶系较全 ，分别有纤维素酶、木聚糖 酶、B一葡聚糖酶、p一甘露聚糖酶、果胶酶等5种不 同的NSP酶。并探讨 了不 同碳源及添加不 同底物 诱 导物对里 氏木霉 Rut(2-30产生的NSP酶系的影响。 关键词 里 氏木霉 Rut(5-30，非淀粉多糖 ，非淀粉多糖酶 里 氏木霉 RutC一30是一种腐生丝状真菌 ， 杭州新华一号快速定性滤纸 ，木聚糖 ：Sig— 能分解不同植物材料产生多种酶类 ，目前 已分 ma公司产品；B一葡聚糖 ：CICC 自制 ；魔芋精粉 ： 离纯化到 的有纤维素酶l、木聚糖酶_2J等。国 由武汉东方天琪生物工程有限公司提供 ；果胶 ： 内外也对其进行了广泛的研究l2。J。 Sigma公 司产品。 非淀粉多糖 (NSP)是植物组织中除淀粉外 1．3 培养基 所有碳水化合物 的总称。NSP可分为可溶性 1．3．1 斜面培养基 NSP(SNSP)和不可溶性 NSP(INSP)，B一葡聚糖 麦芽汁培养基 ：麦芽汁 ，琼脂 2％。 和木聚糖是 2种较为重要 的SNSP。其 中影 响 1．3．2 固态发酵培养基 动物对饲料消化作用 的主要是可溶性 SNSP。 稻草 ，麸皮 ，无机盐 ，适量水分 。 现在普遍认为 ，SNSP可使食糜粘度升高 ，影响 2 方 法 胃肠道运动对食糜 的混合效率 ，从而影响消化 酶与底物接触和消化产物 向小肠上皮绒毛渗 2．1 斜面培养 透f6]。 菌种于斜面培养基上 30℃培养 6d后 ，放 非淀粉多糖酶 (NSP酶)包括纤维素酶 、木 置冰箱 中备用 。 聚糖酶 、G一葡聚糖酶 、G一甘露聚糖酶 、果胶酶等 。 2．3 固态发酵培养 目前人们寻找的能产生各种 NSP酶 的菌株有 在 250mL三角瓶 中装料 35g，用接种环挑 绿色木霉 、红色木霉 、黑 曲霉和索状青霉等 。 取 2～3环孢子与菌丝混合物于 1mL无菌水中 文中利用里氏木霉 RutC一30，以稻草和麸皮作 接种到 35g固态培养基 中，搅拌混匀 。固态培 为基质进行 固态发酵 ，对其产生的5种主要 的 养基于 30℃培养 5d。发酵后酶曲风干备用 。 非淀粉多糖酶 (NSP酶)进行分析 。 2．3 粗酶液 的制备 称取一定量 的固体酶用蒸馏水适当稀释。 1 材 料 2．4 酶活测定方法 1．1 菌 种 2．4．1 纤维素酶活测定方法 里 氏木霉 (Trichodermareesei)RutC30， 参见 国家轻工行业标 准 QB2583--2003 CICC13052(56765)，由中国工业微生物菌种 中，滤纸酶活力 (FPA)的测定方法 。 保藏中心(CICC)提供 。 滤纸 酶活力定义 ：1g固体 酶，在 (50± 1．2 底 物 0．1)℃、pH4．8的柠檬酸钠缓冲液 中，水解滤 第一作者 ：学士，高级工程师。 收稿时间：2004一O5—27