棉铃虫血淋巴酚氧化酶的初步研究-动物学专业毕业论文.docxVIP

⑧ ⑧ 硕士学位论文 llASTER’S THESIS 摘 要 中华卵索线虫(Ovomermis sinensis)广泛寄生于鳞翅目等昆虫的幼虫体内， 是自然界调节昆虫种群数量的一种虫生线虫，可主动寻找宿主，具有资源丰富、 繁殖力强、专性寄生、不污染环境和不易产生抗药性等优点，且寄生率等于宿 主的死亡率，对人畜及环境安全无毒。中华卵索线虫作为一种生物防治材料， 无疑具有广泛的应用前景和重大的科学意义。 棉龄虫(Heliothis armigera)是我国一种重要的农作物害虫，给我国和世 界各国带来了巨大的经济损失。棉铃虫和其它昆虫一样，具有自己独特的免疫 系统，出细胞免疫和体液免疫组成，其中酚氧化酶在体液免疫中占有重要地位。 中华卵索线虫感染棉铃虫后，必然会引起宿主体液免疫系统的变化，其中包括 酚氧化酶活性的变化；而这种变化会影响中华卵索线虫的生长发育。搞清楚这 种变化，有利于提高中华卵索线虫对害虫的防治效果。本文研究了中华卵索线 虫感染棉铃虫后宿主体内酚氧化酶活性的变化。研究结果表明，在感染后的第 1天，中华卵索线虫的侵入引起酚氧化酶活性的增加，感染组酶活性是同期对 照组的1．12倍；但在随后的寄生期间，中华卵索线虫抑制了宿主的酚氧化酶活 性，其中以第5天的抑制最为强烈：同期对照组酶活性是感染组的1．52倍。 为了深入研究酚氧化酶的生物化学性质，进一步阐明酚氧化酶的作用机 理，需分离纯化酚氧化酶。本人用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对棉铃虫血 淋巴总蛋白分离后进行同工酶染色，发现棉铃虫血淋巴有3种MPO同工酶 (MPOI，MP02，MP03)和2种DPO(DP01，DP02)同工酶。采用薄层聚 丙烯酰胺凝胶等电聚焦法测定了DPO同工酶的等电点，发现DPOI和DP02 虽然分子量不同，但等电点相同，均为5．49；而在同样的条件下，MPO同工 酶等电聚焦的结果则不是很理想。经40％饱和度硫酸铵分级沉淀，Sephadex G．200凝胶过滤等步骤，将棉铃虫血淋巴酚氧化酶纯化，纯化倍数为41．5倍， 酶得率为12．7％，比活力为4030．6U／rag，酶得到了初步纯化。 关键词：中华卵索线虫 棉铃虫 酚氧化酶 血淋巴 纯化 生物化学性质 ⑧ ⑧ 硕士学位论文 MASTER’S THESIS Abstract Ovomermis sinensis Chen et a1．，1991 is a kind of insect—parasitic nematode．Many insect species are susceptible to this nematode，and most of them are lepidopteron，for example，Heliothis armigera，Leucania separata，Prodenia litura,Agrotis ypsilon，Spodoptera exigua，Plutella xylostella etc．The insect hosts invariably die when the juvenile nematodes complete their parasite development and exit from the host’s hemocoel．The nematode can’t infect man and domestic animals，and can’t do damage to enviroment，so it has potential for the biological control of a wide range of insect pests．As a natural biological control agent． Ovomermis sinensis has a bright future in application and an important significance in science reseach， Heliothis armigera is a kind of very important pest in agriculture，and causes great economic loss in our country and other countries every year．As a kind of insect，Heliothis armigera has its special immunity system，which is made up of by cellular immunity and humoral immunity．Phenoloxidase plays all importan