分子生物学-转录.pptVIP

Nucleosome movement catalyzed by nucleosome remodeling activities Effects of histone tail modifications Chromatin remodeling complexes and histone modifying enzymes work together to alter chromatin structure RNA聚合酶Ⅱ起始转录后，在最初（mRNA长度～20nt）阶段可以 与其它转录因子（DSIF与NELF）结合而使转录发生短暂的停止， 此时催化mRNA 5’端鸟嘌呤甲基修饰的酶系统通过与CTD相互作用而 可以对mRNA 5’端修饰；加帽修饰完成后，暂停的转录装置在p-TEFb 的作用下使CTD中的Ser-2发生磷酸化，同时磷酸化酶（small CTD phsophotase, SCPs）可以去除Ser-5的磷酸化，磷酸化状态的转变及 DSIF中SPT5亚基的磷酸化及甲基化修饰可以协同去除NLEF对转录 的抑制，使转录重新进入延伸过程。 真核基因转录延伸: 其它一些蛋白质因子如TFⅡS与FACT（facilitate chromatin transcription）等也在 转录延伸中发挥重要作用。 TFⅡS可以减少转录延伸过程中RNA聚合酶Ⅱ在某些 位点的停留时间而增加总体的转录速度；其次，TFⅡS还可以激活RNA聚合酶Ⅱ 内在的RNase活性，从而去除因错误加合的核苷酸，提高转录的精确性，和Gre 类似。 FACT复合物是目前为止体外证明可以协助RNA聚合酶Ⅱ转录通过 核小体模板的转录延伸因子，主要是通过置换去除核小体中H2A/H2B二体，破坏 完整核小体结构而使聚合酶Ⅱ顺利转录通过；又可以重新恢复被转录通过核小体 的结构（具有组蛋白分子伴侣活性）。在转录过程结束时，磷酸酶SSU72及 Fcp1分别可以特异性地去除RNA聚合酶ⅡCTD中Ser-5与Ser-2的磷酸化修饰而 使聚合酶得以循环使用。 Role of CTD phosphrylation during transcription cylce RNA processing enzymes are recruited by the tail of polymerase 在转录延伸过程中，随着RNA聚合酶Ⅱ CTD磷酸化状态的改变，参与mRNA剪接 修饰的蛋白因子会通过与CTD的相互作用使这些过程与转录延伸相偶联。这些 RNA处理过程包括：1）RNA 5’端的加帽；2）剪接；3）RNA 3’的多聚腺苷酰化； RNA 5’端的加帽反应包括三步酶促反应：1） RNA 5’端的一个磷酸基团被RNA 三磷酸化酶（RNA triphosphotase）去除；2）鸟苷酰转移酶（guanylyl transferase） 催化RNA 5’端的β-磷酸基团对GTP α-磷酸基团的亲核攻击，形成新的5‘-5’磷酸 二酯键；3）在甲基转移酶的作用下使鸟嘌呤碱基7位上形成甲基修饰。 The structure and formation of the 5’RNA cap 真核生物基因mRNA 3’末端加尾处理与转录终止是紧密相连的。在被转录基因的 3‘末端具有特定的聚A信号序列(AAUAAA)，当这种序列被转录产生RNA后，可 以促使结合在RNA聚合酶CTD上的聚腺苷酰酶（poly-A polymerase）复合物转移 到新产生的RNA上，并引起mRNA在聚A信号序列后的切割断裂，发生聚A反应， 并转录终止。在介导mRNA切割断裂与聚A反应过程中有两种重要蛋白因子-CPSF (cleavage and polyadenylation specificity factor)与CstF(cleavage stimulation factor)； 而RNA聚合酶在mRNA被切割后仍可以继续转录，但在一种5‘ 3’核酸外切酶 （人Xrn2；酵母Rat1）的作用下被终止转录。 Polyadenylation and termination Detailed poly-adenylation reaction * Francis Crick在1958年提出中心法则，指出信息传递是单向过程，一 旦转变为蛋白质，就不会从蛋白质转回到核酸分子，但遗传信息可 以从核酸到核酸或从核酸到蛋白质. 遗传信息从DNA经过RNA传递到蛋白质的过程称为基因表达 （gene expression）。 任何能较为直接影响转录和翻译过程开启/关闭及发生速率的因素及 其作用过程，称为基因表达调控(regulation of gene expression)。 可以在多层次或水平上进行，如转录起始，转