中性粒细胞碱性磷酸酶.docVIP

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中性粒细胞碱性磷酸酶 ( N-ALP NAP) 碱性磷酸酶包括一组在PH中性以上能够从很多醇和酚的单磷酸酯释放出碱的同功酶。 一.正常分布: 人体血液与造血细胞的碱性磷酸酶活性,主要存在于中性粒细胞系统的成熟阶段中,其他成分如嗜酸、嗜碱、淋巴、单核以及巨核细胞,血小板,浆细胞等均为阴性反应,网状内皮细胞和巨嗜细胞的反应为强阳性。 二.生理变化: 年龄变化:新生儿ALP极高,随后下降,成人较儿童期减低,老年期(6)最低。 性别差异:无差别,但也有报道女男。 季节变化:夏季为高。 应激状态下的变化:紧张、恐惧、休克、激烈运动等。 妊娠期的变化:妊娠2~3个月时。NAP轻度高。以后逐月趋于显著。 与激素的关系:肾上腺皮质激素,雌激素和ACTH都有使NAP活性升高,有人认为ACTH的作用是通过肾上腺皮质而发生的。 三.临床意义: 重度增高: 类白血病反应:NAP活性极度增高与CML鉴别。 感染:细菌感染的NAP改变比较明显,其中,NAP活性高度增高者见于各种急性化 脓性感染(如败血症、大叶性肺炎、化脓性脑膜炎等)。 中度增高: 感染:见于支气管肺炎、肾盂肾炎。 贫血:AA。 非AL性骨髓增生性疾患:PV、骨髓纤维化、CML合并骨髓硬化症、持发性ITP、 AL:ALL。 恶性淋巴瘤:何杰金氏淋巴瘤。 轻度增高: 感染:上呼吸道感染、肺结核等。网状细胞增高,遗传性低NAP症。 AL:MM、神经母细胞瘤。 贫血:溶血性贫血。 降低: 贫血:镰形细胞贫血和阵发性睡眠性血红蛋白尿。 AL:CML显著减低 感染:病毒性感染、特别是病毒性肺炎。 正常或无规律:急粒的NAP活性可减低也可正常。并发感染时可有中度升高。当治疗 后充分缓解时,有些NAP活性可恢复正常。单核细胞改变缺乏的规律性,绿色瘤和 M6与急粒相似。 网状细胞肉瘤多数病例增高,少数在正常范围内。 淋巴肉瘤可增高,可正常。MDS可增高、正常和减低。 主要鉴别: 1.CML—类白 2.PNH—AA 3.ALL—ANLL 4.PV—反应性PV 5.细菌升高—病毒(特别是肺炎) 四.染色方法: 碱性磷酸酶是一种能分解磷酸酯的水解酶,方法不同,原理不同。国际标准化委员会提出。推荐的方法应该是快速,简便,容易重复,并有很宽的技术范围。 方法:(1)钙—钴法 (2)未取代萘酚法:底物а—磷酸萘酚钠。 (3)取代萘酚法:国际标准委员会推荐两种方法: 1963年Kaplow 等:萘AS-BI磷酸盐 1963年Tomonaga等:萘AS-MX磷酸盐 国际标准化委员会认为а—萘磷酸盐产生的反应产物。生色团不好,并且是水溶性的,因此使用这种基质的方法是不满意的,只有考虑应用那些萘磷酸的代用品。适当耦联物的选择是基于从技术观点看耦联物的特性,及它们是否容易获得,这两个方面。萘AS-BI磷酸盐,结果快。萘AS-MX磷酸盐,因为它耗费时间,除日本外其它国家很少了解,但它对白细胞中酶染色的质量是比较好的。其它细胞化学反应的技术因素,如固定pH范围,温浴时间,温浴介质的缓冲作用等也应予以考虑。国外大都应用萘酚AS-BI磷酸。 上海儿研所对三种白细胞碱性磷酸酶染色方法的评价,认为(1)钙钴法平均阳性指数最低仅2.12。虽有人主张延长孵育时间以提高阳性率和阳性指数,但由于孵育时间长,易使阳性产物扩散;且钙—钴法的基质液的配制较麻烦,影响其结果的因素很多。(2)未取代萘酚法虽然反应时间缩短,阳性指数正常值相对较为稳定,但基质液不能长期保存,每次需临时配制孵育液。(3)取代萘酚法较其它方法有以下特点,酶活性显示较充分,正常值68%以上可以显示LAP活性,阳性指数均值较其它方法高,反应酶的钝化与丢失较少,阳性产物色泽鲜明,溶解度低,不扩散,因而定位精确,有利于评定ALP活性强度的分级,例三者平均值。 表一 NAP三种试验方法比较 组 别 钙—钴法 未取代萘酚法 取代萘酚法 阳性率% 阳性指数 阳性率% 阳性指数 阳性率% 阳性指数 范围 X(平均) 范围 X(平均)+SD 范围 X(平均) 范围 X(平均)±SD 范围 X(平均) 范围 X(平均)±SD 高阳性指数组 (N=24) 35-81 68 66-254 210±13.5 40-76 70 45.8-154 101±17 85-100 93 347-540 450.3±5 正常

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