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中性粒细胞碱性磷酸酶
( N-ALP NAP)
碱性磷酸酶包括一组在PH中性以上能够从很多醇和酚的单磷酸酯释放出碱的同功酶。
一.正常分布:
人体血液与造血细胞的碱性磷酸酶活性,主要存在于中性粒细胞系统的成熟阶段中,其他成分如嗜酸、嗜碱、淋巴、单核以及巨核细胞,血小板,浆细胞等均为阴性反应,网状内皮细胞和巨嗜细胞的反应为强阳性。
二.生理变化:
年龄变化:新生儿ALP极高,随后下降,成人较儿童期减低,老年期(6)最低。
性别差异:无差别,但也有报道女男。
季节变化:夏季为高。
应激状态下的变化:紧张、恐惧、休克、激烈运动等。
妊娠期的变化:妊娠2~3个月时。NAP轻度高。以后逐月趋于显著。
与激素的关系:肾上腺皮质激素,雌激素和ACTH都有使NAP活性升高,有人认为ACTH的作用是通过肾上腺皮质而发生的。
三.临床意义:
重度增高:
类白血病反应:NAP活性极度增高与CML鉴别。
感染:细菌感染的NAP改变比较明显,其中,NAP活性高度增高者见于各种急性化
脓性感染(如败血症、大叶性肺炎、化脓性脑膜炎等)。
中度增高:
感染:见于支气管肺炎、肾盂肾炎。
贫血:AA。
非AL性骨髓增生性疾患:PV、骨髓纤维化、CML合并骨髓硬化症、持发性ITP、
AL:ALL。
恶性淋巴瘤:何杰金氏淋巴瘤。
轻度增高:
感染:上呼吸道感染、肺结核等。网状细胞增高,遗传性低NAP症。
AL:MM、神经母细胞瘤。
贫血:溶血性贫血。
降低:
贫血:镰形细胞贫血和阵发性睡眠性血红蛋白尿。
AL:CML显著减低
感染:病毒性感染、特别是病毒性肺炎。
正常或无规律:急粒的NAP活性可减低也可正常。并发感染时可有中度升高。当治疗
后充分缓解时,有些NAP活性可恢复正常。单核细胞改变缺乏的规律性,绿色瘤和
M6与急粒相似。
网状细胞肉瘤多数病例增高,少数在正常范围内。
淋巴肉瘤可增高,可正常。MDS可增高、正常和减低。
主要鉴别:
1.CML—类白 2.PNH—AA 3.ALL—ANLL
4.PV—反应性PV 5.细菌升高—病毒(特别是肺炎)
四.染色方法:
碱性磷酸酶是一种能分解磷酸酯的水解酶,方法不同,原理不同。国际标准化委员会提出。推荐的方法应该是快速,简便,容易重复,并有很宽的技术范围。
方法:(1)钙—钴法
(2)未取代萘酚法:底物а—磷酸萘酚钠。
(3)取代萘酚法:国际标准委员会推荐两种方法:
1963年Kaplow 等:萘AS-BI磷酸盐
1963年Tomonaga等:萘AS-MX磷酸盐
国际标准化委员会认为а—萘磷酸盐产生的反应产物。生色团不好,并且是水溶性的,因此使用这种基质的方法是不满意的,只有考虑应用那些萘磷酸的代用品。适当耦联物的选择是基于从技术观点看耦联物的特性,及它们是否容易获得,这两个方面。萘AS-BI磷酸盐,结果快。萘AS-MX磷酸盐,因为它耗费时间,除日本外其它国家很少了解,但它对白细胞中酶染色的质量是比较好的。其它细胞化学反应的技术因素,如固定pH范围,温浴时间,温浴介质的缓冲作用等也应予以考虑。国外大都应用萘酚AS-BI磷酸。
上海儿研所对三种白细胞碱性磷酸酶染色方法的评价,认为(1)钙钴法平均阳性指数最低仅2.12。虽有人主张延长孵育时间以提高阳性率和阳性指数,但由于孵育时间长,易使阳性产物扩散;且钙—钴法的基质液的配制较麻烦,影响其结果的因素很多。(2)未取代萘酚法虽然反应时间缩短,阳性指数正常值相对较为稳定,但基质液不能长期保存,每次需临时配制孵育液。(3)取代萘酚法较其它方法有以下特点,酶活性显示较充分,正常值68%以上可以显示LAP活性,阳性指数均值较其它方法高,反应酶的钝化与丢失较少,阳性产物色泽鲜明,溶解度低,不扩散,因而定位精确,有利于评定ALP活性强度的分级,例三者平均值。
表一 NAP三种试验方法比较
组 别
钙—钴法
未取代萘酚法
取代萘酚法
阳性率%
阳性指数
阳性率%
阳性指数
阳性率%
阳性指数
范围
X(平均)
范围
X(平均)+SD
范围
X(平均)
范围
X(平均)±SD
范围
X(平均)
范围
X(平均)±SD
高阳性指数组
(N=24)
35-81
68
66-254
210±13.5
40-76
70
45.8-154
101±17
85-100
93
347-540
450.3±5
正常
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