罗格列酮联合替米沙坦对帕金森病MPTP模型小鼠黑质多巴胺能神经元的保护作用-人体解剖与组织胚胎学专业毕业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 Rosiglitazone and Telmisartan Synergistically Prevents Loss of Dopominergic Neurons by Inhibiting Brain Inflammation and Oxidative Stress in an Experimental Model of Parkinson’s Disease Dissertation Submitted to North China University of Science and Technology in partial fulfillment of the requirement for the degree of Master of Medicine by Zhang Chengyun (Human anatomy, Histology and Embryology) Supervisor: Professor Zhang Yu-xin June, 2015 独 创 性 说 明 本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工 作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方 外，论文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，也不包含为获得 华北理工大学以外其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一 同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明 并表示了谢意。 ：论文作者签名 日期：2015 年 6 月 9 日 ： 关于论文使用授权的说明 本人完全了解华北理工大学有关保留、使用学位论文的规定，即： 已获学位的研究生必须按学校规定提交学位论文，学校有权保留、送交 论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以将学位论文的全部或 部分内容采用影印、缩印或编入有关数据库进行公开、检索和交流。 作者及导师同意论文公开及网上交流的时间： □ 自授予学位之日起； □ 自 年 月 日起。 作者签名： 导师签名： 签字日期： 2015 年 6 月 9 日 签字日期：2015 年 6 月 9 日 摘 要 摘 要 目的 研究罗格列酮与替米沙坦单独或联合用药对 1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶 （1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahy-dropyridine, MPTP）所致帕金森病（Parkinson’s disease, PD）模型小鼠黑质中酪氨酸羟化酶（Tyrosine hydroxylase, TH）、离子钙接 头分子-1 抗体(Ionized calcium binding adapter molecule1, iba-1)、p47-phox、诱导型一 氧化氮合酶（Inducible Nitric Oxide Synthase, iNOS）表达的影响，以探讨罗格列酮 联合替米沙坦对多巴胺能神经元的保护作用及其可能机制。 方法 健康雄性 C57BL/6N 小鼠 75 只，随机分为 5 组，每组 15 只。分别为模型组、 替米沙坦组、罗格列酮组、联合用药组和空白对照组。模型组：小鼠每天腹腔注射 MPTP（25mg/kg，生理盐水溶解）1 次，连续 7d；替米沙坦组：每天在 MPTP 注射 前 4h 给予小鼠替米沙坦灌胃预处理（40mg/kg）1 次，连续 7d；罗格列酮组：每天 在 MPTP 注射前 4h 给予小鼠替米沙坦灌胃预处理（4mg/kg）1 次，连续 7d；联合 用药组：每天在 MPTP 注射前 4h 给予小鼠一半计量的药物即替米沙坦（20 mg/kg） 和罗格列酮（2 mg/kg）灌胃预处理 1 次，连续 7d；对照组：腹腔注射与模型组等 量的生理盐水，每天一次，连续 7d。各组小鼠在最后一次注射后 12h 取材。采用免 疫组织化学法观察各组小鼠黑质区酪氨酸羟化酶（TH）阳性神经元数量，黑质区 p47-phox、iNOS 免疫反应阳性细胞数量变化，采用免疫蛋白印迹法检测中脑黑质区 TH、iba-1、p47-phox、iNOS 表达水平的变化。采用免疫荧光双标记发观察 iba-1、 p47-phox、iNOS 与 TH 的共定位情况。采用计算机图像分析法对免疫组化染色阳性 细胞数量和免疫蛋白印迹条带进行光密度分析。所有数据采用 SPSS13.0 统计分析软 件进行统计学处理。 结果 与对照组小鼠相比，模型组小鼠表现出典型 PD 症状。黑质区 TH 阳性神经 元显著大量丢失，蛋白水平亦下降。黑质区 iba-1、p47-phox、iNOS 阳性细胞显著 增加，蛋白水平亦升高；与模型组相比，罗格列酮组小鼠 PD 症状减轻，TH 阳性细 胞数与对照组相比有所下降约 35%