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Contents Hot Tip 仪器:日立L-7100输液泵,L-7400紫外检测器; ODS色谱柱,容量瓶,移液管等 试剂:对乙酰氨基酚对照品,非那西丁(内标 物),对乙酰氨基酚样品(原料药),甲醇 (色谱纯),重蒸馏水等。 色谱柱:ODS柱(150×4.6mm, 5μm); 流动相:甲醇-水(60:40) ; 流速:0.6 ml/min ; 检测波长: 257 nm ; 柱温:室温; 进样量:20μl。 内标溶液的配制: 称取非那西丁约0.25g 50ml量瓶 (甲醇定容) 对照品溶液的配制: 试样溶液的配制: L o g o 1. 实验目的 2. 实验原理 3. 实验内容 4. 思考题 熟悉高效液相色谱仪的使用方法; 掌握用内标对比法的实验步骤、结果 和计算方法。 1. 实验目的 内标对比法 2. 实验原理 对乙酰氨基酚稀碱溶液在(257±1)nm波长处有最大吸收,可以用于定量测定 3. 实验内容-色谱条件 3. 实验内容-色谱条件 3. 实验内容 100ml量瓶(甲醇定容) 精密称取对乙酰氨基酚对照品约50mg 精密量取内标溶液10ml 1ml 50ml量瓶(流动相定容) 精密称取对乙酰氨基酚样品约50mg,其余步骤同上。 3. 实验内容 进样分析: 对乙酰氨基酚对照品溶液经0.45μm 滤膜滤过。用微量注射器吸取续滤液,进样20μl。记录色谱图,重复3次。以同样方法分析试样溶液。按下表记录峰面积。 1 2 3 平均值 Ai Ais Ai/Ais Ai Ais Ai /Ais 试样溶液 对照品溶液 3. 实验内容 结果计算: 按下试计算对乙酰氨基酚的百分含量。 式中mi对照是对照溶液中组分i的量。
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