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3.2.3 提取时间对蛋白质产量的影响 22
3.2.4 固液比对蛋白质产量的影响 23
3.2.5 小结 24
3.3 酶溶法提取蚂蚁蛋白质的研究25
3.3.1 酶占蚁重比对蛋白产量的影响 25
3.3.2 酶解温度对蛋白产量的影响 26
3.3.3 酶解时间对蛋白产量的影响 27
3.3.4 固液比对蛋白产量的影响 28
3.3.5 小结 28
3.4 不同溶剂提取蚂蚁蛋白质的比较29
第四章 蚂蚁蛋白质的药理作用研究 31
4.1 测定试验前后动物的体重31
4.1.1 试验药品与材料 31
4.1.2 试验方法 31
4.1.3 试验结果 31
4.2 小鼠急性毒性试验31
4.2.1 试验药品与材料 32
4.2.3 试验结果 32
4.3 蚂蚁蛋白质抗疲劳作用研究32
4.3.1 试验药品与材料 32
4.3.2 试验方法 33
4.3.3 试验结果 34
4.4 蚂蚁蛋白质抗缺氧作用研究35
4.4.1 试验药品与材料 35
4.4.2 试验方法 36
4.4.3 试验结果 36
4.5 蚂蚁蛋白质改善睡眠作用研究36
4.5.1 试验药品与材料 36
4.5.2 试验方法 36
4.5.3 试验结果 37
4.6 本章小结 39
结论与展望 41
致 谢42
主要参考文献 43
附录46
I
I
蚂蚁蛋白质的提取及其药理活性研究
摘 要
蚂蚁体内含有丰富的蛋白质,被誉为微型动物营养宝库。蚂蚁体内所含的氨基酸中, 有苏氨酸、苯丙氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、色氨酸等 8 种是人 体所必需的。蚂蚁具有多种成分及药理作用,如抗疲劳、抗衰老、提高免疫力、降血糖、 镇痛消炎等。本文对广西大黑蚂蚁进行了研究和探讨,建立了盐提法、碱提法和酶提法对 蚂蚁蛋白质的最佳提取工艺路线以及对三种方法进行了比较,从而得出最优的提取工艺路 线;此外,通过蚂蚁蛋白对小鼠的抗疲劳、抗缺氧和改善睡眠等方面进行了研究;研究方 法和结果如下:
1.以考马斯亮蓝和凯氏定氮法作为检验测定蚂蚁蛋白的方法
2.以蛋白质得率为指标,蚂蚁蛋白的的提取工艺路线为:
(1)盐提法:盐浓度为 1.5%,抽提温度为 20℃,抽提时间为 2h, 固液比为 1:20、 抽提 PH 为 9,在此条件下蚂蚁蛋白的得率约为 63.5%。
(2)碱提法:碱液的浓度为 1.5%、抽提温度为 30℃、抽提时间为 90min、固液比为 1: 15,在此条件下蚂蚁蛋白的得率约为 45.5%。
(3)酶溶法:酶占蚁重比 0.6%、抽提温度为 45℃、抽提时间为 6h、固液比为 1:15, 在此条件下蚂蚁蛋白的得率约为 67.5%。
三种提取方法的比较中,盐提法和酶溶法对蚂蚁蛋白的提取率较碱提法要高。都达到 了 60%以上,且其中以酶提法最高。而盐提法虽然提取率没酶溶法高,但是相差不大,且 因其条件温和,在一定程度上保持了蛋白质原有的性质。所以三种方法中盐提法最好。
4.蚂蚁蛋白药理实验结果:
(1)抗疲劳作用:通过对负重游泳实验、血乳酸和肝糖原等指标的测定得出:蚂蚁 蛋白药剂组相对于空白组明显能延长小鼠负重游泳时间、抑制血中乳酸变化幅度和增加肝 中肝糖原的含量。表明有一定的抗疲劳作用。
(2)抗缺氧作用:药剂组与空白组相比能明显增强小鼠的抗缺氧的能力。
(3)改善睡眠作用:药剂组和空白组相比能延长小鼠的睡眠时间以及增加睡眠发生 率。
关键词: 蚂蚁蛋白,提取工艺,抗疲劳,耐缺氧,改善睡眠
Study on the extraction and pharmacological action of proteins from ants
ABSTRACT
There are plenty of proteins in ants, so it is called the nourishing treasury of subminature. some necessory amino acids, including of threonine, phenylalanine, valine, isoleucine, leucine, lysine, methionine and trvptocine. proteins in ants are pharmacologicalaction. for example, antifatigue, anti-aging, improving immunity, reducing blood suga
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