抗甲氧苯青霉素金黄色葡萄球菌之分子型别分析.DOC

PAGE PAGE II 抗甲氧苯青黴素金黃色葡萄球菌之分子型別分析 Molecular Typing of Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus 研究生：羅惠菁 Liao, Ming-Hui 指導教授：廖明輝 Liao, Ming-Hui 【摘要】 金黃色葡萄球菌（staphylococcus aureus）為造成食物中毒及醫院內感染之主要病原。而抗甲氧苯青黴素金黃色葡萄球菌 ( methicillin-resistant staphylococcus aureus, MRSA ) 於全球之散佈日益嚴重。據文獻中指出MRSA之抗藥性是藉由獲得staphylococcal cassette chromosome mec ( SCCmec ) 基因匣中攜帶之mecA 基因而產生。本研究目的在於進行MRSA菌株之抗藥性基因分析並且建立流行病學相關資料。並進一步探討此菌株之抗藥性與基因型別間之關聯性。本研究檢體來源為 2009 年 1月至 2009 年 12 月間，於屏東地區某醫院內病患身上所分離及鑑定出的MRSA 菌株。本研究方法首先利用生物化學鑑定及抗生素敏感性試驗來進行 MRSA 菌株之鑑定。再利用聚合酶連鎖反應 ( polymerase chain reaction, PCR ) 進行 mecA 抗藥性基因之檢測；隨後以多組式聚合酶連鎖反應 ( multiplex polymerase chain reaction, multiplex PCR ) 來進行抗藥性基因匣分型。本實驗由膿汁、痰液、血液等檢體中共分離鑑定出 210 株 MRSA 細菌。抗生素敏感性試驗，結果發現 MRSA 對β- lactam 類藥物皆產生 99% 以上的抗藥性。而對於 erythromycin、clindamycin 也具有高達 80% 以上的抗藥性。而對trimethoprim / sulfa、 rifampin 兩種藥物有 70~80% 的藥物敏感性，相對而言較具有治療效率。teicoplanin、vancomycin 則具有高達 99~100% 的藥物敏感性，為所有測試藥物中最具治療效率者。PCR 檢測結果顯示210 株 MRSA 染色體內皆具有 mecA 基因存在。 MRSA 之 SCCmec 基因匣型別分析結果， 54% 為第三型基因匣、27% 為第四型基因匣、19% 為第二型基因匣。由上述結果可推知，本實驗所分離之MRSA 菌株當中有 73% 屬於院內感染型MRSA ( health care-associated MRSA, H-MRSA)，而社區感染型 MRSA ( community- acquired MRSA, C-MRSA ) 則相對較少數。本實驗所分離的 MRSA 菌株高達 29% 具多重抗藥性菌株的特性，且 88.5% 多重抗藥性菌株攜帶有第三型基因匣，其餘 11.5% 則是攜帶第二型基因匣。攜帶第四型基因匣之 MRSA 菌株對於多種非β- lactam 類的抗生素仍具有感受性，且並未有多重抗藥性的情形發生。綜合上述實驗結果，預期可提供 MRSA 菌之流行病學及抗藥性參考資料。並期望該資料有助於監控台灣 MRSA 菌株之散佈。 關鍵字：抗甲氧苯青黴素金黃色葡萄球菌，SCCmec 基因匣，mecA 基因， 聚合酶連鎖反應，多組式聚合酶連鎖反應，院內感染型MRSA，社區感染型 MRSA 【Abstract】 Staphylococcus aureus is a major pathogen that causes both food poisoning and nosocomial infection. Furthermore, methicillin-resistant staphylococcus aureus ( MRSA ) outbreaks have become more frequently worldwide. It has been shown that MRSA strains by the acquisition of a staphylococcal cassette chromosome mec ( SCCmec ) element carrying the mecA gene, which is responsible for methicillin resistance. The aim of our study was to assay the antibiotic resistance gene of MRSA strains and to establish the epidemiologic data. T