家蚕微孢子虫NbTom40的原核表达及定位.PDFVIP

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2019-05-11 发布于山东
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家蚕微孢子虫NbTom40的原核表达及定位.PDF

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( ) 第卷第期西南大学学报自然科学版年月 35 5 2013 5 ( ) Vol.35 No.5 JournalofSouthwestUniversit NaturalScienceEdition Ma 2013 y y 文章编号: ( ) 1673 9868201305 0030 07 家蚕微孢子虫NbTom40的原核表达及定位① 1 1 1 罗洁 , 林立鹏 , 潘国庆 , , 1 1 12 刘婷 , 刘显林 , 周泽扬 , ; 1.西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室重庆 400716 , 2.重庆师范大学动物生物学重点实验室重庆 400047 : , 摘要线粒体外膜易位酶是由Tom40基因编码的位于线粒体外膜上的转位酶复合体能够将外界蛋白质转位运输到线粒体基质中最近有研究称在一类仅具有简缩进化的线粒体———纺锤剩体的感染家蚕微孢子虫的基因组鉴定 . , ( ) 到一个基因本文首先通过克隆了长度为的基因通过构建重组载体 NbTom40 . 839b NbTom40 ET30a+ - p p , ( ) , ——— NbTom40 转入E.coliBL21DE3感受态细胞中进行诱导表达经过 HIS抗体的免疫印迹对表达的目的蛋白 , , 31~43kDa间存在一条单一条带进行验证结果显示该条带即为分子量大小正确的带有 HIS标签的目的蛋白然后将其进行 NiNTA亲和层析以及聚丙烯酰胺凝胶纯化并制备多克隆抗体.NbTom40抗体与家蚕微孢子虫总蛋白 - , , , ( ) 的结果显示在处有明显杂交信号与理论分子大小一致最后通过间接